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  • vcningmeng

    第11楼2013/06/17

    2.1MM内径的柱子,流速不小了

    fengmo4668(fengmo4668) 发表:UPLC的流速怎么这么小?

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  • fengmo4668

    第12楼2013/06/17

    还没有接触过UPLC,不知道什么时候可以试一把啊。

    菜头(laohutushen) 发表:UPLC最常用的流量就是0.3了。

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  • fengmo4668

    第13楼2013/06/17

    这么细,感觉和气相柱都差不多了。

    vcningmeng(vcningmeng) 发表:2.1MM内径的柱子,流速不小了

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  • vcningmeng

    第14楼2013/06/18

    和一般GC的填充柱差不多,但毛细管柱子还是要细很多的。

    fengmo4668(fengmo4668) 发表:这么细,感觉和气相柱都差不多了。

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  • vcningmeng

    第15楼2013/06/18

    同感,这个问题一直困扰我,到底是什么原因导致这样的现象,仅仅是因为气泡导致的原因吗?

    上海安谱(SH100959) 发表:是因为释放气泡导致的吗?还是因为其他原因啊?

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  • fengmo4668

    第16楼2013/06/18

    毛细管柱一般都是0.几mm。

    vcningmeng(vcningmeng) 发表:和一般GC的填充柱差不多,但毛细管柱子还是要细很多的。

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  • vcningmeng

    第17楼2013/06/20

    关于标准品溶解溶剂的选择,对于峰型以及响应值大小的影响,这是个非常实际的问题,可以写篇文章了

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  • zy178

    第18楼2013/06/21

    此贴非常具有代表性,严重支持这种有数据有真相的原创帖。

    很多人都不在乎样品溶剂,柱效低时也不会有意识的考虑溶剂效应,希望此贴能提高大伙对溶剂的重视。

    菜头(laohutushen) 发表:昨日实验做完,还有点时间,就发了一帖。
    版内原创太少,抛砖引玉,惟愿版内气氛更活跃些。
    原创无论多少,有意皆可成文。经验总结、实验偶得都行。
    本帖也是实验中一点现象而已。

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  • zy178

    第19楼2013/06/21

    从谱图上看,除了柱效逐渐变低,出峰时间也有少许提前,那单从出峰时间提前这个现象稍作分析:

    这个实验的流动相为水-乙腈(90:10),就C18的特性,流动相中加入甲醇(相对水来说是强洗脱剂),样品组份出峰时间会提前,那么样品中加入了甲醇之后也同样能够起到出峰时间提前,所以我假设了一个造成此现象的原因:样品中的溶剂会影响柱头阶段样品与固定相之间的分配平衡。

    该样品由展青霉素和甲醇水组成,在进样后会同时输送到色谱柱,在刚进色谱柱的瞬间,柱头的环境为展青霉素在流动相和甲醇水及固定相中进行分配,在此微环境中,甲醇水的量足以明显的影响到标准品的分配,相当于在流动相中加入了一定的甲醇,所以导致了峰型差,保留时间提前。随着流动相的继续向前推进,甲醇与展青霉素在过了柱头后被分开,又恢复到了之前的分配平衡中,但是由于柱头那段微环境的影响,柱效已经被破坏。

    按照上述这个假设,随着溶剂中甲醇量的增加,柱效下降,出峰时间提前也就可以解释了。

    vcningmeng(vcningmeng) 发表:同感,这个问题一直困扰我,到底是什么原因导致这样的现象,仅仅是因为气泡导致的原因吗?

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  • 该帖子已被版主-tangtang加5积分,加2经验;加分理由:分析。
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  • vcningmeng

    第20楼2013/06/21

    分析的比较有道理,各位版主专家怎么看?

    zy178(zy178) 发表:从谱图上看,除了柱效逐渐变低,出峰时间也有少许提前,那单从出峰时间提前这个现象稍作分析:

    这个实验的流动相为水-乙腈(90:10),就C18的特性,流动相中加入甲醇(相对水来说是强洗脱剂),样品组份出峰时间会提前,那么样品中加入了甲醇之后也同样能够起到出峰时间提前,所以我假设了一个造成此现象的原因:样品中的溶剂会影响柱头阶段样品与固定相之间的分配平衡。

    该样品由展青霉素和甲醇水组成,在进样后会同时输送到色谱柱,在刚进色谱柱的瞬间,柱头的环境为展青霉素在流动相和甲醇水及固定相中进行分配,在此微环境中,甲醇水的量足以明显的影响到标准品的分配,相当于在流动相中加入了一定的甲醇,所以导致了峰型差,保留时间提前。随着流动相的继续向前推进,甲醇与展青霉素在过了柱头后被分开,又恢复到了之前的分配平衡中,但是由于柱头那段微环境的影响,柱效已经被破坏。

    按照上述这个假设,随着溶剂中甲醇量的增加,柱效下降,出峰时间提前也就可以解释了。

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