应助达人

如果方便的话还可以试试其他的柱子，我用过钙柱分离这四种糖，好处是纯水作流动相，柱子要耐用一些

应助达人

没有用过钙柱，不过也可以一试，氨基柱便宜，钙柱大概是什么价位，看文献还有糖柱可以用，但是咨询了一下好像很贵

应助达人

贴上专业柱标签的一般都贵一些吧，钙柱价格真没记住，已经好几年不做这些样品了，但好像不会和氨基柱差太多。
另外菲罗门公司给的氨基柱再生程序可以试试：以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH10.0的氨水或氢氧化钠水溶液冲柱子（注意pH值切不可超过11.0），立即用水（ 0.5ml/min的流速，30倍柱体积）冲洗，再乙腈/水（80：20）溶液冲洗保存 .备注：250mm长的柱子，1倍柱体积4ml。他们在柱子方面还是很专业的。

学习了！讲解很细致！

应助达人

好的，谢谢您的指导，我会一一尝试的

应助达人

谈不上指导，互相交流而已

楼主说的氨基酸柱子，自己从同款柱子末端取些填补，是怎么操作的，难道就是像平时泥土填坑一样挖点填上夯实吗
可以简要讲解下吗

柱效降低很大的原因是色谱柱的不可修复污染造成，尤其是要注意蜂蜜样品的前处理的工作，我也分析过这四种糖，色谱柱用了一两月柱效就会降低很多，群主又没试过用水定容时和50%乙腈定容色谱峰形的差别和色谱峰响应值的差别？我现在都统一用水来定容了。还有一点是色谱柱的柱温不要太高，建议30-35.

应助达人

呵呵，多交流还是有好处的 取长补短

应助达人

谢谢指导！蜂蜜的前处理就是按照标准上做的，直接用水定容然后过滤膜后上机测试，这样的前处理比较简单，可能会引入杂质进入色谱柱，但是不知道您对样品前处理有何好的建议；用水定容和用50%定容在溶剂峰上肯定是有区别的，文中已经做过实验，用高比例乙腈溶解时会出现糖的水溶液与乙腈分层的现象，取乙腈或者混合立即取样测试峰面积比直接用水溶解或者低比例乙腈水溶解的峰面积小，文中只提到了不能互溶，对于峰面积的变化忘记阐述了，但是做过这方面的实验；标样和样品都用水溶解和定容也是可以的，只是溶剂峰比较大，但是不影响测定；我们现在实际检测时也降低了色谱柱温度，30度也可以的。