应助达人

我之前做新药研发也遇到你这个问题，一般是初期阶段方法学未建立完整，很多时候人家都知道你的数据可信度没那么高，有问题都是正常的，后面完善了方法学后基本就不会存在这个问题。至于说俩个方法分析存在差异是肯定的，同一个化学物质在不同分析方法里面响应值是不一样也不一定是成现行关系的，这也是有很多分析方法里会把有关物质和含量测定分开俩个不同方法测定来的一个原因。至于说哪一个方法更可靠，主要靠你的数据用途来看，你的数据检验者也只会用你提供的方法和标准来检验你的产品是否能达到你所述。

1、处于发展阶段的小公司，我先调方法再试试看；
2、酸性条件A：0.1%磷酸水溶液，PH约2.4，无保留；
碱性条件A：1000ml水中加1ml氨水，PH约10~11；
我有空会继续筛条件的。

非常感谢你的分享！

是的，一开始分析方法存在问题很正常，研发分析也是研发，都是在不断的发现问题解决问题。

你这个碱性条件pH太高了，没几个色谱柱能长期这么使用，我们都没waters柱子，一般试到pH8.5就到极限了

Waters 有些色谱柱的pH耐受范围是1~12，我们碱性条件都是用的是它家的这类柱子，就是它家的都比较贵。之前有选用过菲罗门的色谱柱，说是可以替代它家的这系列柱子，结果使用过程中压力持续缓慢升高，而且正反冲均无效果，用了三四个月就出现峰形分叉的情况，Waters的我们能用两年左右，所以长期来看还是Agilent和Waters的色谱柱更耐用。
请教一下：你们调pH值常用哪些？我们酸性条件用磷酸调，碱性条件用氨水调，缓冲盐主要使用10mM的KH2PO4、K2HPO4、乙酸铵，其它用的就较少了。

浪淘沙隐(zhoujin83) 发表: 你这个碱性条件pH太高了，没几个色谱柱能长期这么使用，我们都没waters柱子，一般试到pH8.5就到极限了

应助达人

讨论的好激烈，谈一下个人的想法。由于用的是归一化法测定纯度，两个方法之间的重现性不好，可能还是与方法有关，一种可能是有组份没有完全分离，或者某些组份没有出峰；还有一种可能就是上述讨论的pH值对出峰的影响，不同pH值下有些物质能出峰，但是在另一个pH值可能就不出峰了，还有就是不同pH值下，峰型或者峰响应值有变化，从而也影响了结果

应助达人

流动相pH值10很高了，在碱性条件下，柱效衰减的比较快。酸性条件可以常用磷酸、乙酸调，碱性条件用氨水、三乙胺调，缓冲盐主要使用磷酸盐、乙酸盐以及离子对试剂

常用的也就这几个了，外加三氟乙酸、三乙胺和甲酸铵。甲酸铵和醋酸铵的缓冲范围不一样，另外选择性也有不同，有时能出奇迹；三氟乙酸也是酸性流动相非常常用的添加剂。

应助达人

待测组分的理化性质可以咨询研发人员的，首先要保证待测组分在分析过程中以一种形式、稳定存在，不然分析结果无效。