改变柱温改善分叉也是比较复杂的，因为存在两种聚焦效应，所以分叉。如果进一步降低柱温，让溶剂聚焦的占比增强，就会发现分叉的前半个峰逐渐升高，后半个逐渐减小，足够低的时候就没有分叉了。但是现在已经是50度了，想再降低很难。所以要反其道而行，升高柱温，让溶剂聚焦的作用减弱，只保留固定相聚焦效应，分叉的前半个峰就会变小以至于消失。但是也不能温度太高，否则固定相聚焦效应也没有了，峰会很宽。所以建议试一下初温65或者70

应助达人

可以考虑使用混合溶剂，可能会好一点

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可以实验提高初温，降低升温速率试试

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可以认为甲醇不能浸润固定相表面，不能形成均一的液膜，致使无法做溶剂聚焦。

弱极性溶剂会好些。


如果提高初温，不使用溶剂聚焦是可以考虑的。


楼主既然提到原先是正常的，那么色谱柱应该有损伤。

应助达人

还是要拉长低温保持的时间，有助于固定相聚焦为好

感谢楼上面的大神们，??应该就是溶剂效应的原因。将初始温度设置成65度，保留2分钟，不分流，结果不会分叉，有轻微的拖尾，如下图1。无论初始40还是50，溶剂聚焦后开始不好，分叉如图2。不进行溶剂聚焦，反倒OK了。改变溶剂的话，甲醇换成了叔丁基甲醚，如图2的第三个色谱图，效果有，但是还是有溶剂效应。
柱子时间有点久了，最开始做的时候，溶剂聚焦没问题，现在再做，溶剂聚焦不如以前，开始分叉。
解决1：变成分流进样，改善明显。
解决2：升高初始温度，干脆不溶剂聚焦，牺牲一点峰型来保证不分叉。

应助达人

甲醇是个问题，如果要使用溶剂聚焦，使用-5ms柱的话，甲醇最好不用。

这个问题还有一个解决方法，就是在柱子前端加一节不涂固定相的空石英管。因为没有固定相，就只有溶剂聚焦效应，就不会分叉了。一般要5米以上长度，因为是用甲醇溶剂，表面必须是强极性脱活的

应助达人

色谱柱长时间使用，造成固定相分布不均匀，也是重要的原因。

原先问题并不严重。

应助达人

溶剂聚焦的要求是， 溶剂应该与色谱柱固定相相容。

所以使用强极性的预柱，可能会改善故障现象。