bludger
第11楼2007/07/22
仪器正常,通过系统的排查,可以确定仪器没有问题,现在我都快郁闷死了!看来只能对溶剂做排查了,明天继续检查,大家有什么建议请提出!
zjjhczl
第12楼2007/07/22
个人意见:梯度洗脱的时候两个溶剂比例变化较快的时候基线会漂。还有你最好把图谱传上来看看,在什么位置出现什么形状
Easy-Boy
第13楼2007/07/23
把梯度换成等度试试,估计是梯度时溶解产生变化所致
lcrzly521
第14楼2007/07/23
我是新手 多看看
zhhp508
第15楼2007/07/23
应该是梯度洗脱的时候产生的.
sun113791
第16楼2007/07/23
给你点建议:1、不要用梯度,直接用单泵,不接色谱柱,用水和乙腈分别直进接走基线,看是不是有此问题?2、改变一下波长,从220nm换成254nm或280nm是不是都有此问题?3、要根据你产品的保留时间来判定,进样如不适,会残留样品在进样器,后会带出来,出现鬼峰。4、检测器如进了气泡,也有可能出现此问题的。5、如一与二,的情况,未出现,你就一步步 接上色谱柱进行试验。6、出现倒峰,实际操作中很正常的,这跟配样品用溶液与流动相之间的配比不同有关系,尽量所进样的溶液与流动相的配比基本相差无几较好。
liuchen
第17楼2007/07/23
是流动相中的水的问题,原因是水中有微量的有机物,因为大家都知道,在做梯度分离时,水相总是从高配比逐渐向低配比过渡,而有机相则反之,由于在水相为高配比时整个流动相的洗脱能力较弱,此时水中的微量有机物被柱子吸附并在柱中富集,随着时间的推移,流动相中的有机相逐渐增多,流动相的洗脱能力增强,富集的有机物被洗脱出色谱柱,形成色谱峰。判断的依据:1.所形成的鬼峰具有较好的对称性;2.具有一定的保留时间规律。关于梯度LC的鬼峰
peggy
第18楼2007/07/23
鬼峰产生得原因主要有五点:1.进样阀残余峰2.样品中得未知物3.柱未平衡4.TFA氧化(肽谱)5.水污染你的仪器出现周期性的鬼峰,我想主要原因应该出在1和3上,可以用强溶剂清洗一下进样阀,而且进样前最好用新的水
儒雅凤
第19楼2007/07/23
出现周期性鬼峰,最大的可能是进样阀被污染,有样品残留在进样阀中,还有就是配制样品时的溶剂与流动相越接近越好
家有宝贝儿
第20楼2007/07/23
30分钟到40分钟之间时乙腈的浓度大概是多少?该阶段剃度是否发生改变?剃度改变对色谱峰会有影响。另外流动相里是否有TFA?剃度改变时TFA也可能是一个影响因素。