体积排阻色谱柱（SEC）

体积排阻色谱（SEC）

精确测定生物分子聚集、断裂和化学配基/修饰

体积排阻色谱（SEC）是一项使用水相洗脱液基于尺寸分离蛋白质、寡核苷酸和其它复杂生物聚合物的技术。

采用SEC 进行聚集体分析研究

蛋白质生物药物中存在的聚集体的尺寸、类型和数量，可能对药效和制剂产生影响——更坏情况下，将引起免疫反应。聚集体的形成有各种机制，包括形成二硫键和发生非共价相互作用。

由于蛋白聚集体，包括二聚体的尺寸与蛋白质单体有很大区别，所以，我们可以用SEC 分离这些不同形式的蛋白质。实际上，SEC 结合UV 或光散射检测是定量检测蛋白质聚集体的标准技术。

采用SEC 进行定量分析和分子量测定

对于蛋白质和其它离散分子量的分子，用SEC 可以对单体、二聚体、聚合体和片段进行检测和定量。SEC 还可以分离寡核苷酸混合物。

对于各种尺寸的生物聚合物，如淀粉和其他多糖，SEC 可以提供分子量分布和支链（用适合的检测器）方面的数据。

安捷伦作为有30 多年SEC 色谱柱和仪器生产经验的领先企业，正不断开发能够提供更高分离度和更快分离速度的新的SEC 产品。本节将着重介绍用于蛋白质生物聚合物分析的各种安捷伦SEC 系列色谱柱：

 有各种孔径的Bio SEC-3 和Bio SEC-5 柱可供选择，非常适合蛋白质的分析——尤其适合测定药用生物制品中的蛋白二聚体和聚集体。请注意，3 μm Bio SEC-3 柱与行业标准的5 μm Bio SEC-5 柱相比，能提供更高的分离度

 ProSec 300S 柱在高盐条件下能很好地分离球蛋白

 ZORBAX GF-250 和GF-450 柱最适合蛋白质的制备型SEC 分离，因为其具有较大的柱尺寸和较

高的流速

 PL aquagel-OH 柱可用于分析宽分子量范围的生物聚合物，例如PEG、寡糖和多糖、淀粉和树脂