牛呼吸综合症病毒抗体Elisa试剂盒操作说明

标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 牛呼吸综合症病毒抗体Elisa试剂盒操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 16pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 8pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 4pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 2pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 1pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 牛呼吸综合症病毒抗体Elisa试剂盒操作程序总结： 1.准备试剂，样品和标准品 2.加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟 3.洗板5次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟 4.洗板5次，加入显色液A、B，37℃反应10分钟 5.加入终止液 6.15分钟之内度OD值 7.计算