使用含CPC的漱口水减小SARS-CoV-2病毒传染性

珀金埃尔默企业管理（上海）有限公司

2022/08/11 15:53

2022年上半年对于我们绝大多数人来说注定是不平凡的一段经历。新冠病毒突变体BA.2 （最近又有报道称BA.5也已出现），在国内急剧传播。对数以万计民众的生活，工作，学习造成的严重的影响。目前虽然病毒爆发式传播已经得到了控制，各地仍有零星散发病/例出现，还需要我们继续保持防疫的警惕性，避免再次出现大规模的疫情爆发。

近期英国《快报》报道，英国卡迪夫大学(Cardiff University)的科学家一项科学研究表明，使用漱口水能减少感染各种细菌和病毒的风险，包括新冠病毒在内。这项研究证实，漱口水在实验室接触到新冠病毒后，可以在30秒内将其杀死。其实早在去年，西班牙研究团队发表了使用含CPC漱口水减小SARS-CoV-2 变种病毒传染性的研究结果。

漱口水中包括氯化十六烷基吡啶 (CPC)，它是一种季铵盐化合物，通过破坏病毒包膜完整性后抑制病毒与靶细胞融合的步骤，降低SARS-CoV-2的传染性。体外实验发现使用含CPC成分的漱口水，SARS-CoV-2的传染性相比对照可降低1000倍以上。CPC对存在于唾液中的不同SARS-CoV-2变种均有效，包括最初在英国发现的B.1.1.7以及Alpha变种。

研究人员首先测试了含CPC漱口水抑制SARS-CoV-2进入靶细胞的能力。使用融合表达萤光素酶和SARS-CoV-2 Spike蛋白的假病毒与表达人ACE2受体的HEK-293T细胞融合，萤光信号用具有超敏化学发光模块的EnSight (PerkinElmer)进行检测。为了消除漱口水自身引起的细胞毒性，采用没有添加假病毒的靶细胞进行平行培养，结果表明：漱口水有效抑制了病毒感染细胞，并呈现出CPC的计量依赖性（图1A, 1C和1E相对对照1B，1D和1F显示出该效果）。图1G显示了CPC的水溶液对SARS-CoV-2假病毒融合并进入靶细胞的抑制作用，1G则表明对不同的突变体都具有一定的效果。

图1 含CPC漱口水抑制病毒感染细胞

随后，研究人员为了搞清CPC是通过何种机制来抑制病毒感染细胞的，利用SARS-CoV-2 D614G突变和B.1.1. 7突变株进行了实验。每种突变株与含cpc口腔冲洗液按1: 1体积比混合。这些样本用PBS进行清洗，超滤两次。收集的病毒直接通过ELISA方法进行衣壳蛋白检测。结果表明，CPC的作用机理正是破坏了病毒包膜，从而抑制其感染（图2）。

图2 假病毒衣壳蛋白检测

通过二维光散射电泳分析，也证实了在CPC的作用下，不同突变株的膜都被破坏并失去了静电斥力（表1）。

表1 衣壳蛋白颗粒散射电泳分析

研究人员接着测试了CPC是否可以降低临床分离的SARS-CoV-2 D614G样本的传染力。将SARS-CoV-2与CPC、含CPC漱口水或对照按1:1的体积比例混合2分钟，用PBS洗涤2次，用大孔离心装置超滤除去制剂。收集的病毒在Vero E6细胞上滴定，计算每次处理后组织培养感染剂量50%(TCID50) /ml。结果显示不但能降低SARS-CoV-2 D614G的感染力，对B.1.1.7 SARS-CoV-2同样有效（图3）

图3 临床分离样本测试

基于上述研究，研究人员发现使用含有CPC的漱口水可以降低新冠病毒的感染风险。因此我们要注意个人的卫生习惯，这样才能最大程度保持来之不易的防疫成果。

在这项研究中，科学家进行假病毒萤光素酶检测实验用到的是PerKinElmer公司的多功能酶标仪EnSight和萤光素酶底物Britelite plus（货号6066769）。EnSight多模式检测仪化配备超敏感化学发光检测模块，独立单光子暗电流PMT，直接紧贴板孔上方进行检测，保证检测灵敏度和减少孔间串扰。

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