超高效液相色谱法用于抗体中唾液酸的测定

2018/09/28   下载量: 27

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本文建立了岛津超高效液相色谱仪LC-30A测定抗体中唾液酸N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)含量的分析方法。该方法具有选择性好、分析快速、重复性好、灵敏度高的特点。

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建立了使用超高效液相色谱法测定抗体中唾液酸N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)含量的分析方法。利用三氟乙酸水解释放出抗体中的唾液酸,以4,5-亚甲二氧基-1,2-邻苯二胺盐(MDB)为衍生化试剂,避光衍生,采用LC-30A结合荧光检测器在11 min内进行检测。实验结果表明:空白溶剂对唾液酸测定无明显影响;Neu5Ac与Neu5Gc分别在0.02~20 μmol/L和0.008~8 μmol/L浓度范围内线性关系良好,线性相关系数均大于0.999,准确度范围分别在96.6%~104.5%与96.5%~102.4%之间;高低浓度样品平行测定6次,二者保留时间RSD为0.34%~0.67%,峰面积RSD为0.33%~1.31%,仪器精密度良好;Neu5Ac与Neu5Gc的检出限分别为0.0012 μmol/L和0.002 μmol/L,定量限分别为0.004 μmol/L和0.0067 μmol/L。该方法分析快速、重复性好、灵敏度高。

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