超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法用于抗体中唾液酸的测定

2018/09/28   下载量: 10

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本文建立了岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8060联用测定抗体中唾液酸N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)含量的分析方法。该方法具有前处理简单、分析快速、选择性强、重复性好和灵敏度高的特点。

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建立了岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8060联用测定抗体中唾液酸N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)含量的分析方法。利用三氟乙酸水解释放出抗体中的唾液酸,以Inertsil Amide酰胺基色谱柱对唾液酸进行保留和分离,采用LCMS-8060在ESI负离子模式下7 min内完成定量分析。本文考察了方法的选择性、线性关系、重复性与准确度及残留,结果表明:空白溶剂及内标化合物对唾液酸定量分析无明显影响;Neu5Ac与Neu5Gc分别在0.02~20 μmol/L和0.008~8 μmol/L浓度范围内线性关系良好,线性相关系数均大于0.999,准确度范围分别在93.4%~111.6%和96.7%~102.8%之间;低中高三个不同浓度的质控品平行测定6次,Neu5Ac和Neu5Gc测定结果的RSD分别为1.45%~2.91%%和0.78%~5.35%,结果均值的准确度分别为86.5%~94.9%和91.7%~101.8%,重复性和准确度良好;空白样品无明显残留,不影响样品中唾液酸的定量测定。该方法前处理简单、分析快速、选择性强、重复性好和灵敏度高。

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