利用原子吸收光谱法直接分析细胞培养基中的金属元素

2020/12/06   下载量: 1

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通过原子吸收光谱法(电加热法、火焰法)测定了3种CHO细胞培养基的金属元素浓度。结果表明仅稀释培养基即可通过原子吸收光谱法测定金属元素,而且发现不同供应商的CHO细胞培养基中的特定金属元素浓度不同。 综上所述,原子吸收光谱法是一种可以简便测定培养基中金属元素含量的方法。 在此次的加标回收试验当中,加标回收率大体良好,但根据培养基的不同,矿物质组分和有机物的存在可能影响加标回收率。

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抗体药物的活性成分主要通过培养CHO(中国仓鼠卵巢)细胞生成。近年的报告指出,正在培养的细胞代谢产物和生成的抗体的一级结构受到培养基营养成分(糖和氨基酸等)及金属元素浓度的影响。例如在培养基中的金属元素方面,当锌(Zn)被吸收到细胞内时,锌(Zn)至少是300种酶和转录因子的辅助因子1),以及附加在IgG内的糖链的结构糖根据培养基中的Mn/Zn比而变化2)等。因此,为保证抗体医药品质量的稳定,监测培养基中金属元素的浓度是很重要的。

到目前为止, ICP-MS或螯合检测技术一直被运用于培养基中金属元素的测定。但是,ICP-MS的初期和运行成本较高,螯合检测技术需要配位高度特异性的螯合剂,因而需要对每种元素进行样本的预处理,过程特别繁杂。

于是我们采用原子吸收光谱法(AAS)测定了培养基中的金属元素,它能够在较低的成本下简便地分析多个金属元素


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