LCMS-QTOF用于mRNA药物加帽的分析

2024/01/04   下载量: 0

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 生物药品药物研发
检测项目 含量测定>其他
参考标准 /

本文使用岛津LCMS-QTOF联用系统,建立了一种mRNA药物加帽分析的方法。在高温条件下,使用聚合物基质反相色谱柱对5´-加帽序列,生物素标记探针等进行分离,并通过LCMS-9050四极杆飞行时间质谱对色谱峰进行鉴定。在260nm下计算各色谱峰的峰面积,单点外标法定量。该方法可用于mRNA药物加帽率的研究。

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基于岛津LCMS-QTOF联用系统,建立了一种mRNA加帽的质谱分析方法。核酸电负性强,本方法采用三乙胺离子对试剂,实现在反相模式分离,流动相中添加六氟异丙醇,促进了核酸在负模式下的电离,对酶解后的mRNA片段进行分离和检测,并分别采用紫外和质谱的数据进行了色谱定性和质谱多电荷解卷积分析,两种工艺的加帽样品均能准确定性Cap1Cap probe,以合成的AGG-38nt-Cap为标准,单点外标法计算Cap1含量,391-s2409-s2Cap1浓度分别为1.53 μM1.72 μM,表明两种工艺加帽效率相当。该方法可用于mRNA加帽效率评估,也可供寡核苷酸质量控制提供参考。


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