近日“瘦肉精”事件的发生使人们再次将注意力集中到动物体内的β-受体激动剂的检测。 我们平常说的“瘦肉精”是一类动物用药,有数种药物被称为瘦肉精,例如莱克多巴胺(Ractopamine)及克伦特罗(Clenbuterol)等。沃特世作为色谱分析行业的领导者,再一次展现了公司集成样品前处理SPE产品、色谱产品、质谱产品于一体的技术优势,在第一时间推出了包含前处理在内的解决方案。
使用沃特世混合型强阳离子交换OASIS®MCX SPE固相萃取柱结合ACQUITY UPLC®/Xevo® TQ超高效液相色谱串联四级杆质谱联用仪,可以在5分钟内轻松、快速、准确的检测到极低含量的“瘦肉精”类物质。例如在猪肉基质中的克伦特罗(Clenbuterol)可以达到低于0.005ppb(5ppt)的检测限。并且在0.05ppb基质浓度下6针重复进样RSD为2.65%。对于猪尿液当中的克伦特罗(Clenbuterol)甚至可以达到0.001ppb(1ppt)的检测限。沃特世UPLC/Xevo TQ 免费附带的Quanpedia方法库已经自带了超过28种常见β-受体激动剂的MRM条件,您无需再对这些化合物进行质谱参数的调谐即可轻松获取分析方法。
图一:沃特世UPLC/Xevo TQ超高效液相色谱串联四级杆质谱联用仪
图二:基质当中0.05ppb克伦特罗(Clenbuterol)的检出信噪比S/N(PtP)>60
图三:克仑特罗系由尿样获得,按照(A)20pg/mL,(B)10pg/mL和(C)1pg/mL加样。
猪肉及猪肝脏中的β-受体激动剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布它林、塞曼特罗、塞布特罗、溴代克仑特罗、溴布特罗、苯氧丙酚胺)的前处理方法如下:
1. 取2 g 粉碎样品,加入8 mL 0.2 M 的pH为5.2的乙酸钠缓冲液,充分混匀后,加入50 μL β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶混匀,于37 ℃水浴水解过夜。
2. 将水解液振荡15 min,在5000 rpm条件下离心分离10 min后,取4 mL上清液,添加100 μL10ng/mL的内标溶液(克伦特罗-D9,沙丁胺醇-D3)混匀,加入5 L0.1M高氯酸混合均匀 并 调节溶液pH 值到1 ± 0.3。以5000 rpm条件下离心分离10 min后,移取上清液并用 10 M 的氢氧化钠溶液调节pH值到11。
3. 加入10 mL 饱和氯化钠溶液和10 mL 异丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液,离心分离后取有 机相,在40℃ 水浴下用氮气将其吹干。
4. 提取残渣中加入5 mL 0.2 M乙酸钠缓冲液(pH 5.2),超声混匀溶解残渣。
5.进行下一步固相萃取净化。(参考下图)
解决方案涉及产品信息:
SPE固相萃取柱:Oasis MCX 3cc/60mg (产品部件号186000254)
UPLC色谱柱:ACQUITY UPLC HSS T3,1.8um 2.1mm*50mm(产品部件号186003538)
HPLC色谱柱:Atlantis T3,5um 2.1mm*150mm(产品部件号186003736)
关于沃特世(www.waters.com)
沃特世通过提供实用、可持续的科学创新为那些基于实验室工作的机构建立了商业优势,能使他们在提供健康、环境保护、食品安全和水质量方面取得杰出成就。
五十年来,沃特世已帮助客户进行意义深远的研究探索、优化操作、提供产品性能、及保证法规遵从等。
沃特世是上市公司(NYSE:WAT),总部设在马萨诸塞州的米尔福德市。它还是标准普尔500指数成员单位之一。现有近4,700 名雇员人。其生产企业位于马萨诸塞州米尔福德和陶顿,以及爱尔兰的维克斯福德,新加坡和英国的曼彻斯特。
在大多数国家,沃特世采取直接销售的方式,以便能与使用其产品的客户保持最紧密的联系。
了解更多有关沃特世公司的详细信息,请访问www.waters.com。
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