用于单克隆抗体肽谱分析的一体化工作流程

2018/06/15   下载量： 6 次

方案摘要

方案下载
应用领域 制药/生物制药
检测样本 预防类生物药品
检测项目 含量测定>其他
参考标准 暂无

单克隆抗体 (mAb) 是制药行业中发展最快的一类药物。mAb 作为蛋白质药物，从初始表达到最终商业化经历了一个高度复杂的过程，需要在每个步骤中对其进行仔细表征。在用于 mAb 表征的众多分析方法中，肽谱分析是一项至关重要的技术，它能够实现 mAb 的一级结构确认，还可以对翻译后修饰 (PTM)（如脱酰氨基化、氧化和糖基化）进行鉴定和定量分析。使用 LC/MS/MS 方法进行的 mAb 肽谱分析包括将纯化的 mAb 酶裂解为肽段、串联质谱分析以及数据解析。样品前处理通常涉及多个步骤，包括变性、还原、烷基化和酶解。手动进行肽谱分析样品前处理的过程十分繁琐，且易于受到可扩展性和重现性不佳的影响。此应用简报展示了一个高通量工作流程，能够同步进行样品消解和样品净化，具有很高的重现性。

方案下载
配置单
方案详情

前言

单克隆抗体 (mAb) 是制药行业中发展最快的一类药物。mAb 作为蛋白质药物，从初始表达到最终商业化经历了一个高度复杂的过程，需要在每个步骤中对其进行仔细表征。在用于 mAb 表征的众多分析方法中，肽谱分析是一项至关重要的技术，它能够实现 mAb 的一级结构确认，还可以对翻译后修饰 (PTM)（如脱酰氨基化、氧化和糖基化）进行鉴定和定量分析。使用 LC/MS/MS 方法进行的 mAb 肽谱分析包括将纯化的 mAb 酶裂解为肽段、串联质谱分析以及数据解析。样品前处理通常涉及多个步骤，包括变性、还原、烷基化和酶解。手动进行肽谱分析样品前处理的过程十分繁琐，且易于受到可扩展性和重现性不佳的影响。

此应用简报展示了一个高通量工作流程，能够同步进行样品消解和样品净化，具有很高的重现性。分析过程中使用 Agilent AssayMAP Bravo 液体处理自动化系统、Agilent 1290 Infinity II 液相色谱与 Agilent 6550 Q-TOF 质谱联用系统（用于灵敏而准确的谱图采集），以及 Agilent MassHunter BioConfirm 软件（用于数据自动分析）。


结论

安捷伦肽谱分析工作流程解决方案集先进的液体处理自动化系统、高效色谱技术、精确质量数 Q-TOF LC/MS 系统与强大的软件于一体，自动处理并精简对 mAb 生物制剂开发至关重要的复杂处理过程。此工作流程采用：

• Agilent AssayMAP Bravo 系统，能够自动进行酶解和样品纯化，具有优异的重现性；

• Agilent AdvanceBio 肽谱分析色谱柱，可实现出色的液相色谱分离，快速分离有助于提高分析实验室的效率；

• 高度准确且灵敏的 Agilent 6550 Q-TOF LC/MS/MS 系统，能够生成无偏差的肽谱分析数据，可实现单克隆抗体蛋白质的全面序列覆盖；

• Agilent MassHunter BioConfirm 数据分析软件，可执行自动数据提取、序列匹配、PTM 鉴定和序列覆盖率计算。


上一篇 使用 Agilent InfinityLab 在线液相色谱 系统实现对流动化学反应器中反应过 程的实时监测
下一篇 利用甲酸作为离子对试剂进行 LC/MS 肽谱分析-使用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱

文献贡献者

安捷伦科技(中国)有限公司
钻石会员 丨 第23年
查看全部资料
相关仪器 更多
相关方案
更多

相关产品

当前位置： 安捷伦 方案 用于单克隆抗体肽谱分析的一体化工作流程

关注

拨打电话

留言咨询