使用 Agilent Poroshell 120 色谱柱最大限度地提高柱效——应用串联色谱柱技术，5 min 内理论板数可达 100000

2018/07/24   下载量： 5 次

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应用领域 生物产业
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基于表面多孔技术的色谱柱可替代亚 2 µm 颗粒色谱柱。配备这些色谱柱的 Agilent 1290 Infinity LC 系统可实现高效分离。Agilent Poroshell 120 色谱柱可提供： • 较低的反压 • 最高的柱效 • 可观的柱容量

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摘要

基于表面多孔技术的色谱柱可替代亚 2 µm 颗粒色谱柱。配备这些色谱柱的 Agilent 1290 Infinity LC 系统可实现高效分离。Agilent Poroshell 120 色谱柱可提供： 

• 较低的反压 

• 最高的柱效 

• 可观的柱容量

前言

近年来，亚2 μm 填料颗粒色谱柱由于其柱效高而备受关注。它可在比范第姆特方程估算的更高流速下运行。与最佳流速下的柱效相比，较高的流速引起的柱效损失可以忽略。亚2 μm 填料颗粒色谱柱减少了运行及循环时间，可更快地获得分析结果。这类色谱柱的缺点是由于粒径小，会显著地引起较高反压。在许多情况下，尤其对于亚 2 μm 长柱，液相色谱仪必须能够承受400 bar 以上的反压。表面多孔填料颗粒技术制备的色谱柱可显著降低反压，从而提供了另一种高分辨率分析方法。与亚2 μm 颗粒填料色谱柱柱效相比，这些色谱柱柱效略低。但由于反压低，可通过串联色谱柱方式获得极高的塔板数。

本应用报告表明三根长的Agilent Poroshell 120 色谱柱串联，可获得极高的柱效。除特殊液相仪器外，反压可以保持在400 bar 以下。这种情况下，较高的流速可节省分析及平衡时间。最后，对2.7 μm多孔外壳色谱柱与亚2 μm 颗粒色谱柱进行了比较。

结论

表面多孔色谱柱可完全替代亚2 μm 色谱柱。较低的背压允许在4.6 mm × 150 mm，2.7 μm 色谱柱上使用1 mL/min 的流速而不超过400 bar 压力限制。在这种情况下，理论塔板数可达35000 或多于235000 /m。三根串联4.6 mm × 150 mm 色谱柱理论塔板数可达100000，在5 min 内柱压不超过600 bar 。

Agilent Poroshell 120 色谱柱在等度和梯度洗脱分析中均获得极好的精密度。相同色谱条件下，可以预期采用Agilent Poroshell 120 色谱柱通常比采用具有类似键合相的亚2 μm 色谱柱洗脱时间短。较短的洗脱时间可获得更窄的峰和更高的峰容量。


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安捷伦科技(中国)有限公司
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