液相色谱柱使用维护小知识

  新色谱柱安装  

购买新柱后一定要仔细阅读说明书，查看柱的保持溶剂、使用PH值范围、最大耐压。 每根色谱柱上都有一个流动方向箭头，不要随意改变流动方向，这样会降低柱效。 使用时记录使用压力。

  色谱活化  

注意：

a.柱子中的保存液体与使用流动相之间要互溶，如果不溶请使用中介流动相（异丙醇或1，4-二噁烷等），由于中介流动相黏度大，请使用低流速；

b.使用厂家推荐的活化程序；

c.正相柱子使用反相模式，一定要注意保存溶剂和使用流动相之间的互溶。

  保护柱  

注意：

a.与分析柱连接时，连接管路尽可能短，且接口切面平滑，尽量减少死体积以降低柱外展宽效应。

b. 卡套式保护柱一般未标注液流方向，使用时最好自行标注，并按照标注方向来使用，以免反向使用后，截留的杂质污染分析柱。

c. 直接填装的短柱型保护柱，出现柱压升高或峰型变差时，可不接分析柱进行反向清洗，清洗溶剂可参考分析柱清洗溶剂。

d. 卡套式保护柱，柱芯替换时，注意柱芯与柱套是否存在方向上的匹配，同时不易旋拧过紧，以防滑丝。

e. 保护柱或柱芯一般不建议超声清洗，因可能对填料表面修饰有影响。

f. 如同一保护柱配不同的分析柱使用，每次使用前，保护柱需先清洗并用流动相平衡保护柱一段时间后，再接分析柱使用。

  柱效降低  

现象：系统压力偏高

故障1：滤片或填料堵塞

解决措施：

a. 打开柱头，清洗或更换滤片

b.断开检测器反向连接色谱柱，使用清洗溶剂冲洗

预防措施：

a.使用预柱

b.缓冲液和溶剂使用0.45um滤膜过滤

c.样品溶液使用0.45um滤膜过滤

现象：系统压力偏高

故障2：样品或流动相中杂质吸附

预防措施:

1.使用预柱

2.缓冲液和溶剂使用0.45um滤膜过滤3.样品溶液使用0.45um滤膜过滤

现象：峰拖尾

故障3：机械振动产生空隙

解决措施：

a.不要撞击色谱柱

b.使用时尽量减少打开放空阀

  色谱柱的清洗  

流动相中若含酸、碱、盐类物质和离子对试剂（庚烷磺酸钠），则要先用10%甲醇冲洗，1.0mL/min的流速冲洗至少30min，再用100%甲醇冲洗至少30min，柱子保存在纯甲醇。（第二天用之前一定要用10%甲醇过渡一下，再换成流动相）。如柱子长时间未用，则柱子保存在100%的甲醇里。

注意：

目前所有的C18柱均不能用纯水进行长时间（1小时以上）冲洗，除非有专门耐水的专用柱，否则，用纯水长时间冲洗色谱柱，会导致色谱柱的固定相流失和相塌陷，损坏色谱柱。