对绿盲蝽具有杀虫活性Bt菌株的筛选及Cry15Aa蛋白活性的研究

2019/05/22   下载量： 13 次

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    Bt棉有效控制了棉田主要害虫棉铃虫(Helicoverpa armigera )，然而原来处于次要地位的刺吸式口器害虫盲蝽(Heteroptera: Miridae)为害逐年加重，目前对绿盲蝽(Apolygus lucorum Meyer-Dür)有效的抗虫基因未见报道。本研究以本实验室保存的Bt杀虫基因和菌株为材料，对绿盲蝽进行杀虫活性筛选。利用本实验室先前克隆的Mtx类杀虫基因cry15Aa表达产物进行绿盲蝽杀虫活性测定，研究结果显示Cry15Aa蛋白对绿盲蝽具有一定的杀虫活性。通过杀虫活性测定，获得对绿盲蝽有效的Bt菌株20株；对这些菌株表达蛋白进行质谱鉴定，LC-MS/MS 质谱鉴定结果显示，这些菌株可能含有 Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Ae、Cry1Af、Cry1Ag、Cry1Ah、Cry1Ba、Cry1Be、Cry8Ha等十余种对鳞翅目、鞘翅目害虫有杀虫活性的蛋白片段，并且有4株Bt菌株样品中检出了Mtx类杀虫蛋白Cry15Aa的片段。但是进一步基因鉴定结果表明，这4株菌株并不含有cry15Aa全长基因，推测这些菌株中含有Cry15类的新基因。上述研究结果表明这些菌株中可能存在对盲蝽有效的新型杀虫蛋白。本研究在发现了cry15Aa基因所表达的蛋白对绿盲蝽具有杀虫活性的同时，获得了对绿盲蝽具有杀虫活性的Bt新菌株，对绿盲蝽的生物防治具有重要的意义。

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