从待分离的植物、动物、微生物中提取单体化合物并进行活性筛选,代谢分析

2019/01/02   下载量: 6

方案摘要

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 中药材和饮片
检测项目 含量测定>色谱法
参考标准 种类、含量、极性、活性

化合物活性筛选是创新药物研究的起点和具有决定意义的步骤。离开筛选,就无从发现具有特定生物活性的新型化学物质,新药的研究开发就将成为无源之水,上海科哲推出的新药筛选相关系列产品将完善我国药物创新体系,对推动全国的新药研究发展具有重要而深远的意义。

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  第一部分 单体化合物的分离

单体化合物分离的第一步从待分离的植物、微生物或动物中提取各类化合物,得到一份总提物对总提物可以进行薄层色谱的分析,大致了解总提物中所含化合物的种类与含量,及其极性大小。其中可以用本公司的SP-30E型全自动薄层色谱点样仪(见图1-1)进行薄层板点样,只需准备好样品,在软件中设置好点样方式,其他均可自动完成。

  

1-1  SP-30E型全自动薄层色谱点样仪

接着,可以将薄层板放入本公司的TK-20E全自动展开仪(见图1-2)进行色谱分离,仪器可以对饱和液与加湿液的使用方式可以准确控制,并对完成色谱分离的薄层板进行干燥。

  

1-2  TK-20E全自动展开仪

而本公司的GoodLook-2000型全自动薄层色谱成像系统(见图1-3)和KH-3000plus型全能型薄层色谱扫描仪(见图1-4)可以对薄层板进行精确详细地分析,为之后的分离工作提供有效帮助。

      

1-3 GoodLook-2000型全自动薄层色谱成像系统

 

  

1-4 KH-3000plus型全能型薄层色谱扫描仪

 

若需要对薄层板用其他试剂进行显色,可以使用TS-20E全自动定量喷雾系统(见图1-5)和TH-数控薄层显色加热器(见图1-6),以及TY-10全自动浸入衍生化器(见图1-7),更加安全可靠。

 

1-5 TS-20E全自动定量喷雾系统

 

  

1-6 TH-数控薄层显色加热器

 

 

1-7 TH-TY-10全自动浸入衍生化器

 

此外,若需要自己铺薄层硅胶板,可使用TD-III 自动薄层铺板机(图1-8)。

 

1-8 TD-III 自动薄层铺板机

 

当总提物中所含化合物的成分非常复杂且极性差别极大时,需要使用不同极性的溶剂进行萃取,对萃取物同样可以进行类似的薄层色谱分析,再通过柱层析对化合物进行分离。PrepChromaster-7000Plus型二元中压制备色谱系统(见图1-9)可以对萃取所得混合物进行快速有效的初步分离,将相同流份合并浓缩。根据流份情况,可继续使用PrepChromaster-6000Plus型四元中压制备色谱系统(见图1-10)进行更加精细分离。

 

   

1-9 PrepChromaster-7000Plus型二元中压制备色谱系统

 

    

1-10 PrepChromaster-6000Plus型四元中压制备色谱系统

 

再次合并相同流份后,用GelMaster-3000全自动型GPC凝胶净化系统(见图1-11)分离,再通过薄层色谱系统分析所得流份

  

1-11  GelMaster-3000全自动型GPC凝胶净化系统

 

若能得到单体化合,就可以通过波谱测试分析化学结构,若还是几个化合物混在同一流份中,则合并相同流份,用PuriMaster-5000二元全自动制备色谱系统(见图1-12)继续分离,最终得到单体化合物,并通过波谱测试分析化学结构。

  

1-12 PuriMaster-5000二元全自动制备色谱系统

 

第二部分 化合物的活性筛选

 单体化合物的体外活性筛选,大致包括生物化学检测法筛选和细胞检测法筛选两种方式,而两种筛选方式,有很大一部分最终依靠检测吸光度、化学发光或荧光来实现,而上海闪谱生物科技有限公司的SuPerMax-3100型多功能酶标仪(见图2-1)就能准确灵敏地完成对紫外可见光、化学发光和荧光的检测。

     

2-1 SuPerMax-3100型多功能酶标仪 

在大部分的生化筛选方式中,蛋白质起着至关重要的作用,因而,分离得到稳定、高纯度的蛋白相当关键,而ClearFirst-3000型蛋白纯化系统(见图2-2)能精确高效的分离纯化蛋白。

  

 

2-2 ClearFirst-3000型蛋白纯化系统

  

  第三部分 化合体内代谢与分析

化合物体内代谢的分析,最基本的一步就是样本的采集,其中包括血样,尿样和脏器组织等。而在分析过程中,经常会遇到样本中待测组分浓度过低,或者样本中的杂质太多,干扰了待测组分的检测等情况,这时候就需要对样本进行快速有效的前处理,使待测组分得到有效的提取和纯化。

本公司的GelMaster-3000全自动型GPC凝胶净化系统(见图1-10)能够高效的去除与待测组分的分子量存在差异的杂质。GoodSPE-3000高通量型固相萃取仪(见图3-1)可以依据待测组分理化性质不同的,选取相应的萃取柱或萃取膜,萃取获得所需的待测组分。

  

3-1 GoodSPE-3000高通量型固相萃取仪

而当样本体积太大,待测组分含量很低时,VNH-300Plus多通道浓缩仪(见图3-2)能高效稳定的浓缩样本,使得待测组分达到检测要求。结合样本特性,通过以上三种仪器的单用或联用,就可以快速高效的实现待测组分的提取和纯化,从而顺利检测样本中的待测组分。

  

3-2 VNH-300Plus多通道浓缩仪


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