方案摘要
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糖基化和PEGYlated是蛋白质变型最流行的形式。前者是接上糖，后者接上聚乙二醇绞合线作“须晶”，以增加蛋白质的半衰期并使其不大可能从血液中水解或被排除。本应用简报证实对于PEGYlated蛋白质由一次15分钟色谱实验可以得到巨大数量的信息。图示完全说明miniDAWN与HPLC系统连接的结合能力。由SEC/MALLS分析得出最重要的结论是： 1． 蛋白质-聚乙二醇-蛋白质连接 因为已知蛋白质仅含8个可能的部位与PEG连接，蛋白质与聚乙二醇结合的最大摩尔质量为56K；蛋白质加聚乙二醇（8 x 5K）为16K。但是，ASTRA软件测定该复合物摩尔质量高达100K，这表明存在蛋白质-聚乙二醇-蛋白质复合物。这些出乎预料的复合物可能对该样品的药理性质发生引入注目的影响。 2． PEGYlated的程度 因为miniDAWN的摩尔质量是绝对值，不须做PEG-蛋白质产品构象的假设即可测定PEGYlation程度。 3． 聚集物检测 低浓度但非常粘稠的（Rg<10nm）非常高摩尔质量（--500K）的物质在大约8ml洗脱。显然，这些聚集物与任何其它范围样品相比散射更多的光。由于FDA涉及周围聚集物，在患者中可能产生缓慢响应，在临床试验之前这些聚集物已被清除。用miniDAWN监测蛋白质聚集的减少对蛋白质改型工艺是有帮助的。 4．反应程度 根据未反应PEG的浓度，可以测定PEGYlation反应的程度。这一信息可用于改进反应过程，改善产品配方效果。
文献贡献者
基因治疗产品之腺相关病毒表征与分析解决方案
美国怀雅特：羟乙基淀粉分子量及分子量分布表征
美国怀雅特：用反相色谱RPC-MALS表征麦蛋白
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