膳食纤维的测定-标准方法
一、实验原理
膳食纤维又称为植物细胞壁,它包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶、角质和二氧化硅等。本实验用中性洗涤纤维测定法测定,该法所测的膳食纤维为不被人消化系统中的酶所消化,也不被中性洗涤剂溶解的组分。其原理是样品经热的中性洗涤剂浸煮后,残渣用热的蒸馏水充分洗涤,除去样品中游离淀粉、蛋白质、矿物质,然后加入α淀粉酶溶液以水解结合态的淀粉,再用蒸馏水,丙酮依次洗涤,以除去残存的脂肪、色素等,残渣经烘干,即为不溶性膳食纤维。
二、实验用品
(一)器材
(1)电热恒温干燥箱。
(2)恒温箱。
(3)可调温的电炉或可控温的电热板。
(4)抽滤装置(包括抽滤瓶及水泵或真空泵)。
(5)干燥器(用无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂)。
(6)高型烧杯(容量600ml)。
(7)坩埚式耐热玻璃滤器(容量为60ml,孔径40~60μm;相当于250目~400目)。
(8)耐热玻璃棉。
(二)试剂
(1)石油醚(沸点范围35~60℃)。
(2)中性洗涤剂溶液
?18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠(Na2B4O7.10H2O)用250ml蒸馏水加热溶解;
?30g十二烷基硫酸钠和10ml乙二醇独乙醚(2-ethoxy-ethanol)溶于200ml热蒸馏水中;
?4.56g Na2HPO4溶于150ml蒸馏水,将??和?3种溶液合并。然后用磷酸调节混合液pH至
6.9~7.1,最后加蒸馏水至1000ml,即为中性洗涤溶液。此溶液使用期间如有沉淀生成,需在
使用前加热到60℃,使沉淀溶解。
(3)十氢萘。
(4)α淀粉酶溶液:取0.1mol/LNa2HPO4溶液610ml和0.1mol/L Na2HPO4溶液390ml混匀,配
成pH7.0的磷酸盐缓冲液。用此缓冲溶液配2.5%酶溶液,离心或过滤,取清液备用。
(5)丙酮。
(6)无水亚硫酸钠。
(三)材料
小麦麸皮。
三、实验程序
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