移液器在动物细胞培养过程中生化参数的测定方法-pH的测定中的作

2023/03/27   下载量: 0

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应用领域 生物产业
检测样本 生物发酵
检测项目
参考标准 移液器在动物细胞培养过程中生化参数的测定方法-pH的测定中的作

通过测量细胞培养液中氢离子活性,根据能斯特方程,离子活度与电极电位成正比,对待测细胞悬液建立起电极电位与活性的关系曲线,得出待测细胞培养液酸性、中性和碱性的数值。

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移液器在动物细胞培养过程中生化参数的测定方法-pH的测定中的作用

(根据中华人民共和国国家标准GB/T 38506-2020)

一、原理

通过测量细胞培养液中氢离子活性,根据能斯特方程,离子活度与电极电位成正比,对待测细胞悬液建立起电极电位与活性的关系曲线,得出待测细胞培养液酸性、中性和碱性的数值。

二、使用仪器

1.试剂制备 pH校准液可根据需要选择不同pH校准液

注:pH校准液可用pH4.01标准缓冲液(邻苯二甲酸氢钾)、pH7.00标准缓冲液(混合磷酸盐)和pH9.18标准缓冲液(硼砂)等。

2. 在线pH电极以及台式pH计:精度0.1

3. 微量移液器:20ul~200ul、100ul~1000ul

三、分析步骤

1. 总则:pH在线检测可与离线检测同时进行,离线检测的结果可用于在线检测结果的复核、校准。

2. 在线检测:在线检测前,需对pH电极进行校准,校准完成后将电极安装到反应器,再进行检测。

3. 离线监测

离线监测前,应对ChemTron PH610专家型台式pH计 进行校准。用SOCOREX 826可调微量移液器 取5ml~10ml细胞培养液至15ml离心管中,按《中华人民共和国药典》(2015年版)三部中的物理检查法进行检测。检测过程中避免晃动培养液。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的5%,否则应重新测定,所取样品应及时检测,避免长时间暴露空气中,导致样品pH变化带来的测量误差。

四、 结果计算

检测后直接读数。计算结果表示到小数点后两位

五、 注意事项

1. 使用pH计前要先进行校准、复核

2. 所取样品要及时检测,避免长时间暴露在空气中




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