Milli-Q讲堂 | 临床实验室LC-MS/MS用水到底该怎么选?
临床诊断中最常用的质谱类型有三重四级杆 LC-MS/MS 和 MALDI-TOF。
特别是前者 LC-MS/MS ,是当前在临床诊断中应用最广的质谱技术。具体应用如维生素检测、药物代谢物检测、毒理学和新生儿筛查等,均推动了该技术在临床诊断领域的发展。
MALDI-TOF 系统最常用来做临床微生物鉴定,也用于基因检测。最近,用 MALDI 质谱成像技术做直接组织分析,分析时间缩短,具有很大的临床应用潜力。
本期 Milli-Q 讲堂将为您一一剖析:
临床实验室LC-MS/MS用水问题
1. LC-MS 技术由离子源、真空接口、质量分析器和检测器组成;根据检测器类型可分为磁质谱、四级杆质谱、离子阱质谱、傅里叶回旋共振质谱、飞行时间质谱。
2. 通常 HPLC 精确度做到 ppm 级别,而 LC-MS 能做到更加精确的ppt 或者 ppb 级别,当然价格 LC-MS 比 HPLC 也要贵。相比 HPLC ,LC-MS 有以下明显的优势:
? 特异性好,免疫分析对小分子化合物的检测缺陷;
? 比 HPLC 和 GC-MS 的容易使用,通量更大,是免疫分析法的主要互补方法;
? 与其他技术相比,单个样本的测试成本更低;建立和验证新方法比较容易。
那么,LC-MS/MS的用水应该怎么选择呢?
临床用水指标主要有四个,根据美国临床实验室标准化协会 Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)定义的“临床实验室试剂级水ClinicalLaboratory Reagent Water(CLRW) ” 以及即将在 2018 年 11 月 1 日中国实施的 WS/T 574-2018 中对 “ 临床实验室试剂用纯化水 ” 定义的指标,我们总结如下:
为什么要定义这四种指标呢?
01 电 阻 率
表示水中离子的含量,电阻率值与温度和水中离子浓度相关。
在温度一定的情况下,水中离子含量越少,电阻率值越高,代表水越纯净。电阻率值和我们熟悉的电导率值互为倒数关系。
电 导 率
▼
电阻率:the inverse of the conductivity
▼
具有代表的离子有Na+/Ca2+/Fe3+/SO42-/Cl-,它们对各类实验的影响主要是:
? 直接影响特定离子的检测;
? 遇到高浓度有机试剂会形成结垢,从而堵塞仪器管路和色谱柱;
? 重金属离子抑制 PCR 聚合酶的活性;
? 影响电泳速度;
? 影响细胞及微生物正常生长;
? 影响滴定反应、pH 值测定等实验结果。
02 TOC
1. 表示水中总有机碳的含量,即有机物含量,典型有机物包括腐殖酸、核酸酶、三聚氰胺、PCB 等,它们对各类实验的影响主要是:
? 影响细胞培养、PCR、杂交等生物学实验;
? 导致液相色谱基线不稳定、鬼峰增加、灵敏度下降、色谱柱寿命缩短等。
▲同时满足TOC<5ppb & 电阻率=18.2 MΩ?cm 的超纯水才能确保 LC-MS 对痕量(ppb级别)有机物的测量需求。
2. 有机污染物的影响—基线漂移、鬼峰:
03 细 菌
监控细菌的指标为细菌总数(cfu/mL)或热源 (Eu/mL),它们对各类实验的影响主要是:
? 细菌本身影响生物学实验和仪器分析实验,裂解释放热原,酶等多种物质;
? 形成菌膜堵塞色谱管路,色谱柱,持续释放各种污染物等。
| 绿浓杆菌
| 酿脓链球菌
04 颗 粒
颗粒和胶体为同一类污染物,主要有硅胶体、泥沙、灰尘、管路剥落,它们对各类实验主要的影响是:
? 阻塞过滤装置、色谱柱,进入色谱柱的颗粒物,还会形成涡流效应;
? 具有光散射作用,降低 UV 的杀菌作用;
? 对仪器的蠕动泵造成表面磨损影响溶剂分配精确度,严重时可造成泵的物理损坏。
临床研究对科学的发展及疾病的治疗都有着至关重要的意义,因此临床试剂及仪器的选择一定要引起大家足够的重视。选择合适的纯水或者纯水系统,才能没有数据溯源,实验结果可靠稳定及实验室认证等后顾之忧。
以上就是今天的介绍,想了解更多不同实验需求的水质选择,以及纯水在临床和其他行业的更多应用,请直接联系 Q 博士哦~
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