抗原修复的几种方法

2010/04/26   下载量: 2

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一、柠檬酸钠法 1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠(pH6.0)的容器中。 2. 微波中高火6-8min。 3. 室温冷却。 4. 用PBS洗涤3次,每次5min。 二、蛋白酶K法 1. 配制新鲜溶液: 25μl 20mg/ml蛋白酶K; 2.5ml 1MTris-HCl(pH8.0); 0.5ml 0.5M EDTA(pH8.0); 加水定容到50ml。 2. 37℃下,将玻片放在架子上孵育5min(蛋白酶K不要预热)。 3. 用PBS洗涤3次,每次5min。 三、尿素法 1. 把玻片放在玻璃固定架上,再将架子放在盛有600ml 的1M尿素(新鲜配制)的容器中。 2. 微波10min,20min或者30min,每5min补充一次蒸发掉的水。 3. 冷却30min到1h。 4. 用蒸馏水洗涤4次,每次3min,再用PBS洗涤3min。

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