科学检测,健康撸串
“世界上没有什么事儿
是一顿烧烤不能解决的
如果有,那就两顿”
然而
烤肉“不健康”等声音
也一直存在
“传言中烧烤对身体不好,其实是说烧烤中含有的苯并芘(běn bìng pí)。”
——浙江大学专家沈立荣
苯并(a)芘,是一种含苯环的稠环芳烃,英文缩写BaP。苯并(a)芘是已发现的200多种多环芳烃中最主要的环境和食品污染物,污染广泛且污染量大,致癌性强。食物在熏制、烘烤和煎炸过程中,脂肪、胆固醇、蛋白质和碳水化合物等在高温条件下会发生热裂解反应,再经过环化和聚合反应就能够形成包括苯并(a)芘在内的多环芳烃类物质,尤其是当食品在烟熏和烘烤过程中发生焦糊现象时,苯并(a)芘的生成量将会比普通食物增加10~20倍。因此对食品中的苯并(a)芘进行检测具有重要意义。
全自动固相萃取-高效液相色谱法测定油中苯并(a)芘含量
本文参考GB 5009.27-2016 食品安全国家标准食品中苯并(a)芘的测定进行前处理,试样经正己烷提取,提取液用Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪净化,洗脱液用Auto EVA 80 高通量全自动平行浓缩仪氮吹,高效液相色谱测定,外标法定量。
Part 01
仪器与耗材
一、仪器
1.睿科集团V20垂直振荡器
2.睿科集团Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪
3.睿科集团Auto EVA 80 高通量全自动平行浓缩仪
4.高效液相色谱仪:Agilent 1260高效液相色谱仪,配有荧光检测器
二、耗材
固相萃取柱:苯并芘专用柱,500mg/6mL,30支/盒(货号:RC-204-91401)
三、试剂
乙腈(色谱纯)、正己烷(色谱纯)、二氯甲烷(色谱纯)
Part 02
实验流程
1.样品制备:称0.4克(精确到0.001g)油样品到15mL离心管中,然后加入5mL正己烷,用V20垂直振荡器振荡混合2分钟,待净化。
2.净化:依次用5mL二氯甲烷、5mL正己烷活化小柱,取全部备用液过柱,用6mL正己烷进行淋洗,用6mL二氯甲烷进行洗脱,收集洗脱液于试管中。
3.浓缩:洗脱液用AutoEVA 80全自动氮吹浓缩仪在40℃下氮吹至近干,再加1mL乙腈复溶,涡旋混匀,过0.22µm微孔滤膜,供高效液相色谱测定。
4.固相萃取方法
图1:苯并(a)芘萃取方法
Part 03
检测条件
表-1 液相检测条件
色谱柱 | Agilent eclipse XDB-C18 (4.6×250 mm,5.0 um) |
柱温 | 35 °C |
流速 | 1.0 mL/min |
进样量 | 20 µL |
流动相 | 乙腈+水=88+12 |
荧光 检测器 | 激发波长384nm,发射波长406nm |
Part 04
结果与讨论
为了验证该方法的回收率,本实验向0.4g油样中加入标准品进行加标回收验证(添加浓度5ng/mL,n=3),数据如表-2所示。加标回收率在88%-93%之间,RSD值控制在5%以内。说明该方法能够很好地运用于油样中苯并(a)芘的测定。
表-2.油脂样品苯并(a)芘加标回收率及RSD值(n=3)
化合物 | 回收率(%) 样品-1 | 回收率(%) 样品-2 | 回收率(%) 样品-3 | 平均回收率(%) | RSD(%) |
苯并(a)芘 | 88.4 | 89.8 | 92.4 | 90.2 | 2.3 |
Part 05
总结
1.净化小柱要选择苯并(a)芘专用固相萃取柱
2.睿科Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪采用全自动操作,可以减少人员操作带来的误差,从活化到上样、洗脱一步到位,六通道同时进行,平行性好;同时搭配EVA 80 高通量全自动平行浓缩仪使用,省时省力,真正为批量检测提供帮助。
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