【CNS前沿文献追踪】 靶向PD-L1和TGF-β的双功能蛋白M7824

之前分享过双特特异性抗体的内容，此次分享的是关于双功能蛋白M7824的内容，不同于双特异性抗体，M7824一端是能识别结合PD-L1的抗体，另一端则是用于trap TGF-β的受体，同时阻断相互独立又彼此互补的PD-L1通路和TGF-β通路能够促进免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤，具体内容如下：

结构设计：全长PD-L1单抗（源于已经上市的avelumb）通过linker 融合TGF-βRII（可识别结合同源二聚化的TGF-β）同时阻断内源/外源两条免疫抑制通路

在细胞及包被相应分子的孔板上验证M7824结合的特异性（C：HEK293表达PD-L1 – 检测对PD-L1结合特异性，D：不同亚型TGF-β包被于孔板 – 检测对TGF-β结合特异性，E：M7824或PD-L1抗体包被于孔板 – 检测对TGF-β结合特异性 F：PD-L1包被于孔板加trap control或M7824后再加TGF-β – 同时检测对PD-L1/TGF-β结合特异性）

M7824能够增强T细胞活性抑制TGF-β信号

M7824药代动力学：非线性代谢，PD-L1阻断趋势与药代动力学曲线一致

M7824能够降低血清中TGF-β浓度（trap之后内化进而清除。TGF-β3清除作用较差，文章作者分析是因为TGF-β3本来含量就很低，因检测方法限制所以没能反映出M7824对其清除能力）

In vivo：M7824能够抑制肿瘤生长（做了多个肿瘤模型验证-略）

In vivo：M7824能够抑制肿瘤转移

In vivo：M7824能大幅延长荷瘤小鼠存活时间，且对存活小鼠再次接种的肿瘤无法生长，暗示M7824产生了长期的保护性免疫反应

In vivo，M7824对于CD8+ T细胞的正向作用：A促进浸润，B促进浸润细胞的激活，C促进浸润细胞的增殖，D促进浸润细胞的成熟，E促进产生effector memory亚型

In vivo，M7824对于NK细胞的正向作用：促进NK细胞的浸润，激活，生长

In vivo，M7824对于DC细胞的正向作用：促进其在肿瘤部位聚集成熟

In vivo，M7824抑制中性粒在肿瘤部位聚集，促进单核细胞聚集

In vivo，M7824促进M1型巨噬细胞在肿瘤部位聚集，但不改变两型比例，降低了TAM的exhausion

还做了流式的“量效”

IHC和流式结果一致，M7824促进了CD8+ T细胞浸润

换了另一个肿瘤模型把免疫细胞变化检测了一遍

药物刺激后进行RNA测序，分析基因表达模式：M7824作用后基因表达模式和PD-L1抗体作用后类似，暗示PD-L1阻断药效团在基因表达层面的影响占主导

基于基因表达的免疫打分：趋势与流式检测的M7824对免疫细胞亚型的影响一致

M7824促进免疫效应分子基因表达

“正着”看完M7824起效机制（激活免疫细胞），开始“反着”看，用抗体去除小鼠体内免疫细胞，观察对药效影响：M7824抑制肿瘤细胞生长是依赖于CD8+ T和NK细胞的，不依赖CD4+ T细胞

M7824上包含了全长的IgG1，所以看一下它是否依赖ADCC作用起效：糖基化M7824溶解肿瘤细胞、抑制其生长的作用和M7824相当，暗示不依赖ADCC发挥作用

α-SMA在TGF-β信号下游，M7824有效阻断了TGF-β信号

联系实际、扩大自己药物应用范围：M7824和放疗联用，提高放疗疗效

M7824和放疗联用促进了“远位效应”

联系实际、扩大自己药物应用范围：M7824和化疗联用，提高化疗疗效

目前M7824已进入I期临床试验用于治疗实体瘤，关于这篇文章笔者觉得有趣的点：1、做双功能蛋白而非双特异抗体，文章作者选的两个功能都是阻断免疫抑制通路，却又巧妙相关-PD-L1药效团将M7824带到肿瘤部位，到位后TGF-β药效团在肿瘤微环境内可发挥作用trap TGF-β，trap之后整个复合物会内化入胞实现对TGF-β的清除；2、不光做细胞、蛋白水平的检测，还做了测序检测基因表达，得到数据后与细胞、蛋白数据关联-数据更完整、有说服力；3、以“放化疗的副作用之一是促进TGF-β、PD-L1表达”作为理论基础进行过渡联系实际、扩大自己药物应用范围！产生这样思想的底层是什么呢......

Lan Y, Zhang D, Xu C, et al. Enhanced preclinical antitumor activity of M7824, a bifunctional fusion protein simultaneously targeting PD-L1 and TGF-β[J]. Science Translational Medicine, 2018, 10(424):eaan5488.

想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568！