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01 研讨会 介绍与主持人背景
研讨会主题:探讨超分辨率技术如何突破分辨率障碍,在生命科学领域的应用与优势。
主持人:Frankie Giuttanta,ONI客户成功科学家,拥有亚利桑那大学生物物理学博士学位。
02 分辨率 的定义与重要性
生命科学领域应用:高分辨率成像对研究细胞、分子结构至关重要。
定义:分辨率指能够区分两个彼此接近的点的空间距离,常用单位为纳米。
03 超分辨率 技术优势
实际应用案例:展示超分辨率成像下细胞结构的详细差异,如细胞外围尖刺状结构与卷曲结构的区分。
传统显微镜分辨率限制:约250纳米。
超分辨率技术突破:分辨率提升至20纳米左右,提高约10倍。
04 超分辨率 技术原理
点扩展函数与曲线拟合:每个荧光蛋白的闪烁被拟合为点扩展函数,通过曲线拟合确定位置。
单分子定位:核心技术之一,通过荧光蛋白的闪烁实现单分子定位。
闪烁现象:荧光蛋白在不同时间点被激发,形成类似圣诞彩灯的闪烁效果,从而进行定位。
05 实时成像 与分析平台
CODI云平台:用户可通过浏览器访问,查看全球客户上传的样本数据集,进行数据分析,如聚类分析。
纳米成像仪:实时数据采集与定位,立即获得超分辨率图像渲染结果。
06 超分辨率 技术类型
DNA-PAINT:通过DNA标记抗原表位,利用寡核苷酸互补结合实现闪烁,进行超分辨率成像。
dSTORM:常用技术,通过添加还原剂促使荧光染料闪烁,适用于固定细胞。
PALM:利用可激活荧光染料,适用于活细胞单分子追踪。
07 应用 案例
EV(细胞外囊泡)研究:超分辨率成像揭示EV表面的生物标志物分布及内含物,用于诊断与治疗。
细胞结构:展示核孔蛋白、线粒体等细胞器的超分辨率图像,揭示精细结构。
病原体研究:如HIV、埃博拉病毒的超分辨率成像,观察病毒与宿主细胞的相互作用。
神经元成像:通过dSTORM和多色成像,特异性标记神经元上的表位,观察其分布情况。
08 技术与服务 的结合
实时分析与云平台:不仅提供高分辨率图像,还通过CODI平台提供实时数据分析,加快科研进程。
提供训练套件:包含所有试剂,适合初学者入门。
09 用户 反馈与互动
提供荧光染料推荐清单及学习应用程序,帮助用户开始超分辨率成像研究。
鼓励用户在问答环节提问,强调提问有助于记忆与实验设计。
总结:本次研讨会全面介绍了超分辨率技术的原理、优势及其在生命科学领域的广泛应用。通过单分子定位等核心技术,超分辨率技术成功突破了传统显微镜的分辨率限制,为研究者提供了前所未有的细胞与分子结构细节。同时,ONI提供的实时成像与分析平台进一步简化了科研流程,加速了科研进程。
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