方案摘要
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样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下: nH2CH2COOH+3H2SO4——2CO2+3SO2+4H2O+nH3 (1) 2nH3+H2SO4——(nH4)2SO4 (2) (nH4)2SO4+2NaOH——2H2O+Na2SO4+2nH3 (3) 反应(1)、(2)在凯氏瓶内完成,反应(3)在凯氏蒸馏装置中进行。 为了加速消化,可以加入CuSO4作催化剂,K2SO4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液,滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。 计算所得结果为样品总氮量,如欲求得样品中蛋白含量,应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量,即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。
双向电泳蛋白点的切取和保存
血清蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳
猪流感H3N2ELISA试剂盒使用说明书
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