文献速递:Blotcycler洗液工作站完美契合Western Blot实验,用于兴奋剂检测的条件比较和优化
Comparison and optimization of SAR‐PAGE tests for erythropoietins in doping analysis【WILEY】
兴奋剂检测(SAR-PAGE法测定红细胞生成素)的条件比较与优化
期刊:WILEY(IF:5.90)
发表年份:2019
单位:国家体育总局反兴奋剂中心(中国反兴奋剂中心)
摘要:
促红细胞生成素(EPOs)刺激红细胞的生成,增强运动员体能及耐力,属于世界反兴奋剂机构(WADA)清单S2中列出的违禁品。根据目前的WADA技术文件,筛查和确认所有EPOs类型的唯一方法--基于分子量分离的肌氨酰聚丙烯酰胺凝胶电泳(SAR-PAGE)后进行蛋白印迹杂交(Western Blotting)。免疫纯化和蛋白转移的效率对于确保EPOs筛查的选择性和灵敏度至关重要。本研究对SAR-PAGE步骤进行了一些比较和优化,即根据不同的免疫纯化方法,优化第一次印迹实验的转膜条件,对尿液和血液样本的选择性、重复性和灵敏度进行了比较,同时建立并比较了尿液和血液分析的快速流程。与常用的恒流方法相比,1.0 mA/cm2 进行60 min然后1.56 mA/cm2 进行20 min的两步转膜流程可有效提高印迹效率。不同的免疫纯化方法在选择性和敏感性方面无显著差异。考虑到操作复杂性、时间和成本等因素,对尿液的筛查和确认分别使用StemCell®纯化试剂盒纯化后进行单次印迹和磁珠纯化后进行双次印迹。血液样本的筛查和确认分别使用磁珠和MAIIA®试剂盒纯化后进行双次印迹。对尿液和血液分析进行双次印迹的快速流程可确保高灵敏度和高选择性。
研究中使用Blotcycler进行标准印迹杂交替代人工操作,保证严格统一的标准程序,有效提高单印迹杂交的稳定性和重复性。
原文
Comparison and optimization of SAR-PAGE tests for erythropoietins in doping analysis
Xinmiao Zhou, Lisi Zhang, Sen He, Li Shen, Chunji He
First published: 30 October 2019
https://doi.org/10.1002/dta.2703
来自美国Precision Biosystems公司的Blotcycler,是一款全自动的蛋白质印迹杂交系统,可自动化完成封闭、孵育、清洗和一抗回收的一系列工作,彻底解放您的双手。专利的流体清洗减少二抗在膜上的附着,降低背景,提高信噪比和灵敏度;自动化的操作流程避免了手工操作带来的误差,保证了批次内和批次间实验的高度重复性;高通量操作和多条件的设定可以辅助您优化Western Blot 实验的条件;开放的实验平台,无需其他额外投入。Blotcycler是从事Western Blot实验的科研工作者最佳选择。
环亚生物,生命科学产品全国性代理商,不断把国外顶级的创新产品引入中国。环亚生物具备完善的公司运营、产品管理、营销、售前技术支持和售后维修体系。环亚生物作为Precision Biosystems产品大中华区独家代理商,负责Blotcycler在大中华区的营销和售后支持。
▼更多 Blotcycler 产品详情,请联系我们▼
环亚生物科技有限公司
地址:上海市闵行区友东路358号闵欣大厦1号楼701/703/705室
电话:021-54583565
邮箱:info@apgbio.com
网址:www.apgbio.com
▼更多精彩内容,请扫码关注我们▼
Cas9辅助靶向测序检测林奇综合征相关基因PMS2的大片段倒位现象
Regemat 3D生物打印机助力皮肤相关的生物墨水开发
Blotcycler助力缺血性中风脑神经功能恢复的药物靶点研究
全自动DNA片段回收系统助力ddRAD-Seq测序进行大规模种群遗传多样性研究
相关产品
关注
拨打电话
留言咨询