教您如何操作ELISA试剂盒使用步骤

上海纪宁实业有限公司

2015/02/03 14:18

TA的动态

ELISA试剂盒质量保证是一个复杂的过程，许多重要的环节都影响到检测的质量：

1.定性测定

2.半定量测定结果一般以滴度表示。

3.定量测定即用已知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA测定，绘制标准曲线，结果以绝对量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须绘制相应的标准曲线。

4.结果报告

ELISA试剂盒操作步骤：用于检测未知抗原的双抗体夹心法

1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ **。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5.　终止反应

6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

公司生物秉承“品质经营，诚信服务”的经营理念，以务实、创新、诚信为企业精神，与多家科研机构建立长期合作关系，热忱为广大科研工作者提供优良的服务。
本公司现有各类生化试剂6000余种，，抗体及荧光标记抗体千余种，以及生物试剂盒等备货充足，都经过内部检测。

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