人甲胺喋呤(MTX)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

2016-06-16 09:25  下载量:1

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人甲胺喋呤(MTX)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胺喋呤 (MTX) 。用纯化的人甲胺喋呤(MTX)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲胺喋呤(MTX),再与 HRP标记的甲胺喋呤(MTX)抗体 ,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲胺喋呤(MTX)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人甲胺喋呤(MTX)浓度。 试剂盒组成 标本要 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过(HRP)活性。 计算 以标准物的浓度为横坐标, OD值为纵坐标,在坐标纸上 ,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有 析出,稀释时可在浴中加温助溶,洗涤时不影响 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在 5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD值 大于标准品孔第一孔的 OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

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