首先，我们先从选择试剂开始，应该选择优良的ELISA检测试剂盒，并且严格按照试剂说明书进行操作，操作前应高将时机在室温下平衡半小时到一个小时左右的时间。这是第一步。
接下来就是加样、孵育、洗板、显色等步骤了。
我们先从加样说起，在ELISA检测试剂盒实验的过程中，选择了试剂之后就是加样了， 对于加样来讲，可能会出现加完标本再加酶试剂时酶溅出空外，或者手工操作时，加样板过多造成家养后放入孵箱前等待时间过长，针对这样的问题，我们家养后应及时放入孵箱，加完酶试剂后立即用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干，如果标本比较多的时候。
对于孵育来讲，如果孵育时没有贴封片或者加盖，会使标本稀释或者蒸发的，如果时间人为的去延长了，还会导致非特异性结合紧附于反应孔的周围，不容易彻底的清洗，我们在做孵育这一步骤的时候一定要帖封片或者加盖，然后，对于操作时间一定要按照说明去做的。
ELISA检测试剂盒实验第三部就是洗板，这一步骤如果采用手工洗板，孔与孔之间的液体会交叉，加入采取半自动洗板机的时候，如果洗液量不足的话，也会导致洗板不彻底，针对这些原因，我们应该保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完之后，最好用吸水纸在上面轻轻拍干而不是擦干，并且要合理安排或者使用多肽洗板机。
ELISA检测试剂盒实验最后一步就是显色了，这一步，也有很多要注意的地方，例如，显色剂配置后，放置时间过长，或者使用过期的显色剂，都会出现不显色，等多种原因，我们要杜绝使用过期的显色剂，并且加显色剂的时候，要保证显色剂不外流。这样，结果才能更精准的呈现。
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