细胞核蛋白微量制备试剂盒

上海瑞齐生物技术有限公司

2014/09/02 20:55

产品及特：DNA只存在于细胞核内，因此参与转录调节和DNA复制的蛋白质主要存在于细胞核中，要研究蛋白质与DNA的相互作用，首先需要制备能够与DNA作用的天然细胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐，一次处理大量样品时尤其不便，为此本公司开发了本产品，用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微量提取，它具有下列特点：

1. 提取制备过程简便，只需要一小时。

2. 实验重复性好，尤其适合同时处理多个样品。

3. 可用于培养的动物细胞，也可以用于组织细胞。

4. 制备的核蛋白能保持天然活性，可以直接用于转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA足迹图实验和甲基化干扰实验酶活性测定等研究。

规格及成分

成份25次包装100次包装溶液A10 mL40 mL溶液B2.5 mL10 mL使用手册1份1份

运输及保存

低温运输、4℃保存，有效期一年。

自备试剂

无

使用方法

1、对培养细胞：将覆盖率为55-65%的培养细胞用自备的胰酶溶液（天泽产品编号：90306）按标准的胰酶法处理，然后刮到1.5mL塑料离心管中，室温离心30秒，小心弃上清。

2、对悬浮细胞：直接将5×105-7个的悬浮细胞转移到1.5mL塑料离心管中，室温离心30秒，小心弃上清。

3、用1.5 mL自备的PBS缓冲液洗涤细胞沉淀一次，然后室温离心后弃上清。

4、在细胞沉淀中加入400 uL溶液A，用手指弹管壁使沉淀悬浮起来。

5、冰浴10分钟，涡旋激烈震荡10秒混匀。

6、室温离心10秒种，小心弃上清。

7、在沉淀中加入100 μL溶液B，轻轻混匀使沉淀悬浮起来。

8、冰浴20分钟。

9、 4℃离心2分钟，小心收集上清液（细胞核提取物），可立即用于后续的凝胶滞后实验、BCA法蛋白浓度测定或活性检测等实验，也可以分装后放-70℃长期保存。

说明：本方法可以从1×106的细胞中得到50-70ug的核蛋白质。

细胞核蛋白微量制备试剂盒

Nuclear Protein Miniprep Kit

上海瑞齐生物科技有限公司
021-60513568

shrqsw@163.com

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