头孢妥仑匹酯(Cefditoren pivoxil)是头孢菌素类抗生素,用于敏感菌引起的各种感染。吸收后在肠管壁代谢成头孢妥仑而发挥抗菌活性,对革兰氏阳性菌及阴性菌具有广泛的抗菌谱,尤其对葡萄球菌属。
本文实验中采用了常规凝胶色谱柱TSKgel G2000HHR(7.8mm I.D.×30cm)与半微型凝胶柱TSKgel SuperH2000(6.0 mm I.D.×15cm)分别对客户提供的头孢妥仑匹酯相关物质样品进行了分析比较。
色谱柱:TSKgel G2000HHR(7.8mm I.D.×30cm)两根串联
洗脱条件:DMF+30mMLiBr
流速:0.33 mL/min
样品浓度:1 mg/mL(头孢妥仑匹酯的调整保留时间约为44分钟)
进样量:20 μL
柱温:25 ℃
检测条件:UV检测器@280 nm
图1. 1 mg/mL头孢妥仑匹酯色谱图
从谱图中可以看到,使用常规30cm凝胶柱时样品整体分析时间较长(接近50 min), 于是我们尝试使用半微型色谱柱TSKgel SuperH2000(6.0 mm I.D. ×15 cm)2 根串联进行分析。
装置:HLC-8320GPC(日本东曹产)
色谱柱:TSKgel SuperH2000 (6.0 mm I.D. ×15cm) 两根串联
流动相:DMF+30 mmol/L LiBr
流速:0.3 mL/min
样品浓度:1 mg/mL左右
进样量:2 uL
温度:室温
检测器:UV检测器@280 nm
图2. 1 mg/mL样品头孢妥仑匹酯色谱图
综上实验结果,使用两根半微型色谱柱TSKgel SuperH2000串联分析,可以满足头孢妥仑匹酯中有关物质的测试要求,相比常规凝胶柱方法可节省30 min以上分析时间,并且更省溶剂。
但需要注意的是,在死体积较大的HPLC系统中,无法充分发挥半微型色谱柱的性能,建议使用死体积小的HPLC系统或东曹GPC专用色谱系统。
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