豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)ELISA说明书

2015-02-28 13:55  下载量:0

资料摘要

资料下载

豚鼠(Guinea pig)卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)ELISA检测试剂盒使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预 先包被卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)抗体的包被微孔中,依次加 入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底 物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用 下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的卵清蛋白特异性IgE (OVA-sIgE)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞 刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地 分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟 取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于 -20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 自备物品 1. 酶标仪(450nm) 2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒温箱 操作注意事项 1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的 浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解 后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3. 浓度为0 的S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明 书操作时样本已经稀释5 倍,最终结果乘以5 才是样本实际浓度。 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 试剂盒组成 名称 96孔配置 48孔配置 备注 微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无 标准品0.3mL*6 管0.3mL*6 管无 样本稀释液6mL 3mL 无 检测抗体-HRP 10mL 5mL 无 20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释 底物A 6mL 3mL 无 底物B 6mL 3mL 无 终止液6mL 3mL 无 封板膜2 张2 张无 说明书1 份1 份无 自封袋1 个1 个无 注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、1.5、3、6、12、24μg/mL 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20 稀释,即1 份的20×洗涤缓 冲液加19 份的蒸馏水。

资料下载

文献贡献者

相关资料 更多

相关产品

当前位置: 上海盈公 资料 豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)ELISA说明书

关注

拨打电话

留言咨询