羰基含量试剂盒说明书

2015-07-06 13:30  下载量:1

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详细介绍:   羰基含量测定试剂盒说明书      规格:100T      该产品由军事医学科学院研发监制      一、羰基含量测定试剂盒原理      天然蛋白质分子中氨基酸残基不含有羰基,但活性氧在金属离子的介导下,可使氨基酸残基中自由氨基或亚氨基氧化最终生成NH3和相应羰基衍生物。羰基衍生物可和2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙衍生物,后者在387nm处有强吸收。通过测定羰基水平可以表征蛋白质分子是否受到活性氧氧化损伤。      二、羰基含量测定试剂盒试剂组成      A.检测缓冲液(含盐酸胍)250ml      B.2、2,4-二硝基苯肼试剂25ml三、羰基含量测定试剂盒样品制备      1.测定每一蛋白质时需要参考有关文献分离提取该蛋白质。      2.血清和组织液(如关节液、淋巴液)可直接测定。      3.组织脏器总羰基测定:用20mMpH6.4磷酸缓冲液按20%(W∕V)制成匀浆,3000rpm离心10min,取上清测定。      四、羰基含量测定试剂盒测定步骤      1.取A试剂和B试剂按9:1体积混合,混合液为AB液。      2.取AB液2.5ml加入0.5ml样品液,于25℃反应30min。      3.对照设置:用2.5mlA试剂加入0.5ml样品液。      4.用分光光度计于387nm测定吸光值。

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