最近和师姐都要制备单细胞悬液,我用贴壁细胞做流式,她用组织做单细胞测序,两人一顿操作,结果大翻车:我的细胞成团了都不敢上流式细胞仪,她的组织解离过头细胞存活率太低根本送不了样,浪费了样本,组会上成了挨批姐妹花……
单细胞制备看起来简单,其实需要注意的地方很多:
首先,是不同样本的处理方式:悬浮状态的细胞、磁珠富集的细胞或流式分选的细胞,只需要进行清洗和计数;贴壁的细胞需要进行胰酶消化;组织类样本需要通过机械法或酶解法进行解离。
其次,是控制细胞的死亡率,避免小口径移液管对细胞进行吹打造成细胞损伤,当细胞悬液活率低于 70% 时建议进行去除死细胞处理。
既要警惕消化不完全无法形成单个细胞,又要注意不可以处理过度细胞死亡率飙升。费尽心血收集的样本,在我手里就没一点出路了吗?
实际上,单细胞悬液的制备已经有了成熟的解决方案。单细胞悬液制备仪是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代细胞悬液制备设备,应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验。本次上海净信特别为有需求的同学提供了单细胞悬液制备仪(温控型)4WK 的试用套装试用申请活动。
该单细胞悬液仪器具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。采用国际 DIN 方法设计,低噪音,使用方便,性能稳定,带加热功能,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态。
样品范围:
应用领域:肿瘤研究、心血管研究、干细胞研究、免疫研究、神经科学研究
产品应用:
单细胞测序(Single-Cell RNASeq)
多色流式分析(Multicolor Flow Cytometry)
质谱流式细胞计数(Mass Cytometry)
原代细胞分离培养(Primary Cell Isolation And Culture)
细胞治疗 CAR-T
优势:
组织高利用率、单细胞化过程高效、单细胞高产出;
操作简易,制备流程全自动,仅需 30 min 即可获取大量单细胞悬液;
自动控温,保护样品活力,细胞活性可达 85% 以上;
多种消化方案,针对不同样品选择不同程序,针对不同组织均有独家配套试剂盒;
针对临床穿刺样本,使组织的利用率达到 100%,细胞产量可达 10 万个以上;
针对原细胞培养样本,在 15 min 内完成组织到单细胞过程,降低细胞逆境时间,提高细胞存活率
针对组织单细胞测序,快速完成单细胞化处理,获得高产且活率在 85% 以上的单细胞,以小鼠组织为例:
操作流程:
实验效果:
技术参数:
【共庆十年】德国代表团莅临上海净信,续写中德合作新篇章
单细胞悬液制备仪|小鼠视网膜单细胞制备操作
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脱脂棉样品制备:超离心研磨仪的使用
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