设想一下: 您已经花了无数个小时精心设置你的活细胞成像实验。细胞正处于鼎盛时期,显微镜也已经准备就绪,您渴望深入研究细胞动力学的迷人世界。您可曾想过!在您进入寒冷的暗室开始这场细胞冒险之前,有一个经常被忽视的因素会显著影响您的实验结果: 湿度。是的,这种看不见的细胞伴侣在你的活细胞显微镜实验中起着举足轻重的作用。在这篇文章中,我们将探讨湿度的重要性,以及为什么您应该给予它应有的关注。如果您认同我们的观点,我们还会提供一些湿度解决方案,帮助您成功实现活细胞成像。
在我们深入探讨湿度在活细胞成像中的作用之前,让我们花点时间了解一下每个细胞内发生的生命的复杂性。细胞就像忙碌的小工厂,分子机器协调细胞分裂、信号转导和细胞器功能等基本过程。显微成像技术处于细胞生物学研究的前沿,为科学家提供了实时观察和研究活细胞的后台通道。它为研究人员提供了对细胞过程和相互作用的见解。要成功进行活细胞成像实验,您必须创造一个支持细胞活力和生理功能的环境。这包括温度、pH值和湿度等控制因素。
就像行星为生命找到理想条件的适居区域一样,细胞也需要合适的湿度平衡才能茁壮成长。太少的话,它们会比太阳下的葡萄干干得更快。太多的话他们就会被水浸透,变得不合作。湿度水平通常在90–95%的相对湿度范围内,为您的细胞创造一个舒适的环境。保持这种平衡对于活细胞显微镜检查来说至关重要,因为它可以确保培养皿内的条件与细胞的自然栖息地非常相似。这样,会带来更准确、更可靠的结果。
大鼠成纤维细胞在不同相对湿度(RH)水平下完全生长培养基中培养48小时。相差显微镜,20倍物镜
湿度对显微镜的影响
现在,您可能想知道湿度是如何影响显微镜的。嗯,显微镜就像导演椅子,配有摄像机。它需要合适的条件来捕捉场景。以下是湿度对细胞的影响:
1、细胞行为
湿度水平的变化会影响细胞形态、运动性,甚至基因表达。细胞被浸没在舒适的培养基层中,对周围的渗透条件高度敏感。当湿度不足时,水会从细胞培养基或缓冲液中蒸发,导致溶质浓度增加和渗透压降低。这引发了渗透效应的连锁反应,导致离子浓度发生变化。这种变异会破坏许多细胞的进程,包括跨细胞膜运输、蛋白质折叠和基因表达。
2、数据再现性
在科学研究中,再现性至关重要。实验之间湿度条件不一致可能会给结果带来不必要的变化。这就像想要烤出完美的蛋糕,却用了一个有问题的烤箱。通过控制湿度,您将增加获得一致且可重复数据的机会,这使你更容易从实验中得出有意义的结论。
3、光学失真
湿度会影响活细胞图像的光学质量。低湿度会引发细胞培养基内离子浓度的变化,导致培养基折射率的波动,并产生光学畸变。图像可能会像美术馆里的一幅超现实的抽象画——都是波浪形。另一方面,高湿度会导致冷凝,从而产生水滴,阻碍光路并影响成像质量。
4、蒸发
细胞非常敏感,即使是微小的环境变化也会使它们失去平衡。当湿度较低时,就会出现问题。任何湿度的降低都会引发细胞培养基中的水分蒸发,留下过量的盐和矿物质。然后,这种有毒物质的积累会对细胞构成威胁,往往导致细胞死亡。
5、气体交换
湿度不仅影响水分含量,在气体交换中也起着至关重要的作用。它对包括氧气在内的气体在生长培养基中的溶解方式有直接影响。当湿度水平波动时,由于其与压力的内在联系,它可能会破坏气体的溶解度。在湿度不足的情况下,气体交换可能会受到影响而导致细胞培养物内缺氧。通过确保稳定的湿度水平,将为细胞提供舒适呼吸的能力,而无需微型氧气罐!
总的来说,湿度不仅仅是活细胞成像中需要考虑的随机因素,它也是一个可以显着影响实验结果的关键参数。保持适当的湿度水平将确保您的细胞保持健康、自然运行,并产生可靠且可重复的数据。为了实现精确的湿度控制,必须采用湿度管理解决方案。
成功进行活细胞成像的湿度解决方案
1、使用恒温恒湿箱
当谈到为活细胞成像实验保持理想的湿度水平时,用湿度室或显微镜用活细胞培养系统可以实现。这些专用设备可精确控制湿度和温度,确保细胞有宾至如归的感觉。
在这类设备中,ibidi Stage Top活细胞工作站确实脱颖而出。它可无缝连接到几乎所有标准倒置显微镜,这使其成为一种通用的选择。由于ibidi的特有技术可以保持湿度,细胞不会受到长期检测中可能出现的常见不良影响。它们也是高分辨率显微镜的理想选择,因为它们提供了聚焦稳定性,并确保加热的盖子上不会出现令人讨厌的冷凝。
有关ibidi Stage Top Incubators 活细胞工作站更多信息请点解查看
ibidi Stage Top Incubator
2、密封严密
为了保持适当的湿度水平,必须对培养皿和培养室进行紧密密封,以防止水分流失。可以使用ibidi的ibiSeal轻松实现这一目标,ibiSeal是一种自粘式覆盖膜,专为密封细胞培养和显微镜应用中的开放孔和储液池而设计。此外,ibidi µ-Dishes 独特的设计是带锁的盖子。当盖子处于lock位置,很大程度减小蒸发的影响,从而能进一步加强湿度控制。
ibiSeal
3、封口膜
将小片封口膜放在细胞培养容器的储液池/孔上可以抑制蒸发的影响。
4、定期监测
在实验过程中持续监测湿度水平。设置湿度计来密切关注环境。值得注意的是,此功能是ibidi Stage Top Systems的内置功能。
总结:在细胞成像条件下保持细胞湿度!
湿度:这位活细胞成像的无名英雄是深刻影响实验结果的质量和可靠性的关键因素。在成像环境中保持湿度水平对于确保细胞活力、防止脱水引起的伪影以及促进动态细胞过程的准确观察至关重要。精确控制湿度不仅可以维持细胞生存所需的生理条件,还有助于很大限度地减少实验的可变性,提高研究结果的可重复性,减轻湿度对细胞的影响。研究人员需要认识到湿度控制作为活细胞显微镜实验方案不可或缺的组成部分的重要性。它使细胞行为的研究在更生理学相关的背景下,推进我们对复杂的生物现象的理解。
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