本篇我们将探讨在不同研究领域使用ibidi μ-Slide Chemotaxis进行的5项最新研究。
在本篇文章中,我们将探索跨越不同领域的5种不同的检测趋化性的实验方法:
* 纳米技术
* 癌症研究
* 转化研究
* 神经生物学
* 基于RNAi的方法
通过使用我们ibidi的μ-Slide Chemotaxis载玻片进行实时可视化,这些研究将为您提供对细胞反应的动态洞察,并为您定制自己的趋化性分析提供一个强大的框架。从而激发新的视角,推动医学领域的创新战略。
概述
趋化性是细胞对化学信号的反应,是生物学中的一个基本现象,具有深远的意义。不同领域的研究人员利用这一过程来探索细胞行为、免疫反应和发育机制。在癌症研究中,趋化性揭示了细胞如何导航其环境,从而促进肿瘤的进展和转移。在免疫学中,趋化性将免疫细胞引导到感染部位。除了基础研究之外,了解这一现象在医学和生物技术中也有应用。
在本文中,我们将探讨研究论文,重点介绍研究趋化性的不同方法。这些研究的重点是实时可视化,提供对细胞反应的动态见解。实时测量捕获关键事件和动力学,与终点方法相比,从而提供对趋化运动的全面了解。这使研究人员能够揭示影响我们理解这一基本生物现象的复杂细节。
1. 纳米粒子作为“分子敲除”破坏趋化性[参考文献1]
在这项跨学科研究中,Zhang等人探索了纳米颗粒(NPs)通过“分子敲除”破坏趋化性的潜力。该研究旨在验证NPs可以有效吸附趋化剂分子,从而降低其生物利用度,从而抑制趋化性的假设。该实验利用了一个成熟的涉及人类单核细胞系THP-1及其化学引诱剂单核细胞化学引诱蛋白-1(MCP-1)的模型系统。
利用与MCP-1具有不同预测相互作用的金纳米颗粒(AuNPs)库,该研究在趋化性分析中模拟了细胞外基质的体内3D环境。研究结果强调了化学引诱剂吸附对纳米颗粒的深远影响,改变了它们在细胞附近的浓度并驱动了细胞行为的变化,而所有这些都不需要纳米颗粒物理进入细胞。这种创新的方法提供了对NPs如何作为分子调节剂的理解,为研究和操纵趋化反应的新策略开辟了途径。
2. NET-DNA作为癌症转移的动态趋化因子[参考文献2]
Yang等人的这项研究探讨了中性粒细胞胞外诱捕网(neutropl Extracellular Traps, NETs)及其在癌症转移中的作用。net是由DNA、蛋白质和组蛋白组成的网状结构,由中性粒细胞释放,用于捕获和中和病原体。该研究揭示了乳腺癌和结肠癌患者肝转移灶中NETs的丰富程度,挑战了NETs仅作为微生物陷阱的传统观念。相反,NET-DNA作为NETs的一个组成部分,作为一种动态趋化因子出现,积极吸引癌细胞促进远处转移的形成。
通过使用Transwell和μ-Slide Chemotaxis测定进行细致评估,该研究证实了NET-DNA促进 MDA-MB-231三阴性乳腺癌细胞迁移和粘附的显著能力。细胞迁移的剂量依赖性增强进一步强调了这种效应,这种现象在用DNase I处理后被消除。μ-Slide Chemotaxis测定证实了这些发现,揭示了MDA-MB-231细胞向更高的NET-DNA梯度的有效迁移。这些发现为理解免疫反应、NET和癌症进展之间复杂的相互作用开辟了新的途径,为转移性疾病的治疗干预提供了潜在的靶点。
3. Prokineticin-2在CNS损伤星形胶质细胞趋化中的作用[参考文献3]
在这项神经生物学研究中,Neal等人揭示了Prokineticin-2 (PK2)(一种趋化因子样信号蛋白)的新维度。他们的发现揭示了其在促进星形胶质细胞趋化性方面的关键作用——这是中枢神经系统(CNS)损伤的一个重要机制。当中枢神经系统受伤或患病时,星形胶质细胞会被激活并迁移到受损部位,从而促进再生反应。基于PK2已知参与巨噬细胞和单核细胞等系统细胞类型的激活和迁移,该研究探讨了PK2是作为星形胶质细胞的趋化因子。
使用ibidi µ-Slide Chemotaxis和U373人星形细胞瘤细胞系,研究人员证实PK2确实可作为趋化因子,显着增强星形胶质细胞的迁移。在重组PK2 (rPK2)存在的情况下,观察到正向迁移指数(yFMI) 明显增加,这强调了对含有PK2的储层的明确定向响应。这种迁移的方向性增强伴随着迁移速度和方向性得分的显著增加,强调了PK2作为星形细胞趋化性刺激因子的影响作用。
了解更多有关µ-Slide Chemotaxis的实验工作流程可点击查看Experimental Workflow of a Chemotaxis Assay
4. 血小板裂解物负载PEG水凝胶诱导干细胞趋化性[参考文献4]
在这项转化研究中,Chahal等人研究了载人血小板裂解物(PL)的聚乙二醇(PEG)水凝胶在体外诱导干细胞趋化的潜力。血小板裂解物含有多种已知介导细胞活性的蛋白质和生长因子,其中一些被鉴定为能够诱导细胞迁移的化学引诱剂。该研究探索了使用掺入90 vol% PL的PEG水凝胶来检测其对人类间充质干细胞(hMSCs)的迁移影响。
使用μ-Slide Chemotaxis进行细胞迁移研究。跟踪细胞轨迹和迁移参数显示,hMSC表现出向负载 PL 的水凝胶的定向迁移,与对照组相比,显示出更高的速度和直接性。这项研究强调了负载PL的PEG水凝胶的生物活性潜力,展示了其吸引干细胞的能力——这是内源性组织工程应用的一个令人兴奋的前景。
5. RAB35在定向运动和趋化性中的作用[参考文献5]
在这项关键研究中,Corallino等人揭示了RAB35在控制最佳方向运动和趋化性方面不可或缺的作用。利用基于RNAi的方法,该研究将RAB35确立为协调这些基本细胞过程的关键要求。
Sticky-Slide Chemotaxis(货号:80328)
为证实这一观点,该研究深入研究了对照和RAB35沉默的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)在血小板衍生生长因子(PDGF)梯度中通过精心设计的柱阵列的迁移行为。该微柱阵列由光固化杂化聚合物组成,并以4μm的间距隔开,粘附在sticky-Slide Chemotaxis 细胞趋化可粘载玻片的自粘底面的中心区域。从细胞储液池入口区域策略性地接种细胞,并在细胞出口区域以20ng/ml的浓度引入趋化剂(PDGF)。用倒置显微镜观察记录细胞的动态运动。
对照细胞组表现出功能性RAB35通路,显示出对PDGF梯度的定向趋化性。这些细胞延伸出持久的迁移突起,主要与梯度方向一致排列。形成鲜明对比的是,RAB35的缺失显着损害了趋化性,同时减少了沿梯度方向突出的细胞数量。通过延时监测细胞运动,并通过趋化和迁移工具分析手动跟踪的细胞。这种综合实验方法强化了RAB35在响应趋化信号而控制细胞定向运动方面的关键作用,为了解这些基本细胞过程背后的分子复杂性提供了宝贵的见解。
结论
这些研究对细胞响应化学信号的行为进行了引人入胜的探索,跨越不同的领域,比如; 纳米技术、癌症研究、转化研究、神经生物学和基于RNAi的方法。总的来说,这些研究不仅促进了趋化性研究的发展,而且激发了新的视角和方法,推动了医学领域的创新战略。
有关如何进行趋化性测定和分析结果的更多详细,可点击#细胞趋化进行查看相关文章或联系我们详询!
1.Zhang, X., P. Falagan-Lotsch, and C.J. Murphy, Nanoparticles Interfere with Chemotaxis: An Example of Nanoparticles as Molecular "Knockouts" at the Cellular Level. ACS Nano, 2021. 15(5): p. 8813-8825.
2.Yang, L., et al., DNA of neutrophil extracellular traps promotes cancer metastasis via CCDC25. Nature, 2020. 583(7814): p. 133-138.
3.Neal, M., et al., Prokineticin-2 promotes chemotaxis and alternative A2 reactivity of astrocytes. Glia, 2018. 66(10): p. 2137-2157.
4.Chahal, A.S., et al., Human Platelet Lysate-Loaded Poly(ethylene glycol) Hydrogels Induce Stem Cell Chemotaxis In Vitro. Biomacromolecules, 2021. 22(8): p. 3486-3496.
5.Corallino, S., et al., A RAB35-p85/PI3K axis controls oscillatory apical protrusions required for efficient chemotactic migration. Nat Commun, 2018. 9(1): p. 1475.
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