现在由于ELISA试剂盒检测的方便，许多寻常百姓也会购买ELISA试剂盒来做，ELISA试剂盒的种类很多，有人ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、大鼠ELISA试剂盒等各种，不过在人们的心目中，目前还是进口ELISA试剂盒比国产ELISA试剂盒要好。不管是进口的还是国产的ELISA试剂盒，在实验的时候，我们总是不可忽视实验的背景影响，那么怎样才能把试验背景影响降低到最低呢？
1.洗涤：看似无聊的步骤，其实是实验的重中之重，因为如果未结合的材料（如非特异结合的抗体或检测试剂）残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。如有必要，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。
2.密封：封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。
如果您一直被背景问题所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、ELISA试剂盒吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
3.抗体浓度： ELISA试剂盒实验我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤，ELISA试剂盒但是如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。记住，非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。
4.检测试剂：切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高，或者未正确稀释，则会导致高背景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应加入终止液
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