ELISA试剂盒测读结果更稳定

上海纪宁生物科研有限公司

2016/06/16 10:22

此时可用特定的波长（450nm）测读吸光值。酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读ELISA试剂盒研发结果吸光度的光度计。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001，ELISA试剂盒准确性为±1%，重复性达0.5%。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15~30℃，使用前先预热仪器15-30 分钟。
ELISA试剂盒测读A 值时，要选用产物的敏感吸收峰，如OPD 用492nm 波长。方法

1、加入待测标本每孔0.05ml，并设HBsAg阳性对照2孔，HBsAg阴性对照2孔，空白对照1孔，然后加入酶结合物每孔1滴(0.05ml、空白对照孔不加)，充分混匀后置37℃孵育30分钟。

2、洗板:弃去反应条孔内液体、拍干、用洗涤液注满每孔，弃去拍干，反复五次后拍干。

3、显色剂:先加显色剂A每孔1滴(0.05ml)，然后再加显色剂B每孔1滴(0.05ml)，混匀，37℃孵育10分钟。

4、每孔加终止液1滴(0.05ml)，混匀。

结果

比色法:波长450nm，先用空白孔校零点，然后读取各孔光密度值。

样品OD值/阴性对照平均OD值≥ 2.1判断为阳性，否则为阴性。

备注：阴性对照平均OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。阳性对照OD值≥0.8，实验结果有效。

注意事项

1、ELISA试剂盒置2℃～8℃保存。

2、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。

3、从冷藏环境中取出试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔条，置室温平衡30分钟后再行测试，余者应及时封存于冰箱中以备后用。