鱼脂肪酸( FA)酶联免疫

2015-07-02 15:40  下载量:0

资料摘要

资料下载

使用目的: 本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中脂肪酸( FA)含量。实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼脂肪酸( FA)水平。用纯化的鱼脂肪酸( FA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂肪酸( FA),再与 HRP标记的脂肪酸( FA)抗体结合,形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。 TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂肪酸( FA)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度( OD值),通过标准曲线计算样品中鱼脂肪酸( FA)浓度。试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品( 1600ng/L) 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔 × 8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂 A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂 B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于 -20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的( HRP)活性。操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl, 然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 3 0分钟。 4.配液:将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30秒后弃去,如此重复 5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同 3。 8.洗涤:操作同 5。 9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀, 37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零, 450nm波长依序测量各孔的吸光度( OD值)。测定应在加终止 800ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入 150μl标准品稀释液 400ng/L 4号标准品 150μl的 5号标准品加入 150μl标准品稀释液 200ng/L 3号标准品 150μl的 4号标准品加入 150μl标准品稀释液 100ng/L 2号标准品 150μl的 3号标准品加入 150μl标准品稀释液 50ng/L 1号标准品 150μl的 2号标准品加入 150μl标准品稀释液

资料下载

文献贡献者

相关资料 更多

相关产品

当前位置: 基免 资料 鱼脂肪酸( FA)酶联免疫

关注

拨打电话

留言咨询