利用CRISPR/Cas系统进行基因组编辑可以对小鼠受精卵中的小鼠基因组进行直接地修饰,从而开发出高效、快速、一步法产生,且不携带胚胎干细胞的基因敲除小鼠,相比有针对性地进行靶向基因剔除,即进行靶向基因插入的技术而言,这种利用CRISPR/Cas系统介导的基因组编辑技术目前而言仍然是一项比较艰巨的任务。
近日,来自东京医科牙科大学的研究人员在国际杂志Genome Biology上刊登了其最新的研究成果,他们通过开发一种高效的CRISPR/Cas系统克服了当前的研究障碍,这种技术可以实现较长基因盒的靶向插入,包括在受精卵中以高达50%的效率将增强绿色荧光蛋白插入到小鼠的基因组中。
文章中,研究人员再现了CRISPR/Cas系统的天然状态,其包括三种组分:Cas9蛋白、CRISPR RNA(crRNA)以及反义激活crRNA,这种新型系统取代了常见的利用两种组分的系统,即Cas9 mRNA和单一导向RNA(sgRNA);这种改进的CRISPR/Cas系统可以提供便利高效的基因修饰,同时也可以成功传递给后代。
在未来这种改进后的CRISPR/Cas或许可以进行多种用途,包括开发可以模拟人类疾病的人源化小鼠、药物代谢研究、免疫及感染性疾病的研究;研究者表示,准确的靶向插入将可以有效改善病人进行基因疗法的安全性,而这种改进的系统或许也可以用于其它研究,比如畜牧业生产等
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