缺氧条件下NRF-1基因过表达的大鼠心肌细胞增殖和凋亡变化

上海钰博生物科技有限公司

2018/11/08 16:30

构建核呼吸因子-1（NRF-1）过表达的大鼠心肌细胞,观察缺氧条件下细胞增殖和细胞凋亡的变化。方法将大鼠心肌细胞H9C2分为NRF-1过表达组、空载体组和正常对照组,NRF-1过表达组和空载体组分别用NRF-1过表达慢病毒及空载体病毒进行转染,正常对照组不做处理。将三组细胞置于缺氧用三气培养箱中进行缺氧培养（37℃、1%O₂+5%CO₂+94%N2）24 h。采用实时无标记分析（RTCA）技术观察缺氧6、12、24 h时的细胞增殖水平,流式细胞仪检测缺氧24 h时细胞凋亡率,qRT-PCR法检测缺氧24 h时半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）mRNA的相对表达量。结果缺氧12、24 h时,NRF-1过表达组细胞增殖水平高于正常对照组和空载体组;缺氧24 h时,与空载体组和正常对照组比较,NRF-1过表达组细胞凋亡水平降低,且caspase-3 mRNA表达水平较低（P均<0.05）。结论 NRF-1过表达可以降低缺氧条件下心肌细胞的凋亡,从而提高心肌细胞在缺氧条件下的存活能力。

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