供货周期: | 现货 |
品牌: | ATCC |
规格: | 株 |
货号: | yb3021 |
CAS号: |
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)具体操作:
1.首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为第一步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。
2.然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)。
3.吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与瓶子头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)这是第三步。
4.然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)应用举例:
1.细胞表面分子的检测与分析;
2.细胞内或细胞核内抗原检测与分析——如胞内细胞因子、调节性T细胞(Treg,CD4+CD25+Foxp3+);
3.细胞凋亡的检测与分析——如PI单染法、Annexin-V-PI复染法、末端转移酶标记技术(TUNEL)、细胞周期特异性细胞凋亡的检测(PI-Annexin-V,PA法);
4.DNA含量检测与细胞周期的分析——如药物对细胞周期的影响、流式细胞核型分析;
5.细胞增殖的检测与分析。
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)服务流程:
1.根据细胞特点、实验特点或实验需求,设计实验方案并与客户讨论确定实验方案;
2.进行预实验,通过转染含有GFP报告基因的质粒确定最佳转染试剂,并优化转染条件;
3.杀伤曲线绘制;
4.转染质粒,铺板,用不同抗生素浓度筛选细胞单克隆;
5.qPCR和WB检测稳定克隆的外源基因表达水平。
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)注意事项:
1. 原代培养,一定要避免污染。
2. MEF生存能力有限,如果不冻存,体外存活十代左右。
3. 冻存后复苏的细胞只能传代一次,因为这些细胞繁殖能力有限。
4. 消化细胞时间不要过长。
一般实验流程
1筛选浓度测定:以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度
2细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
3细胞转染(病毒、脂质体、电穿孔、FuGENE 6)
4利用质粒上含有的抗性选择进行筛选
5鉴定筛选结果
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)相关产品展示:
COS-1非洲绿肾
COS-7非洲绿猴肾细胞
CV-1猴肾细胞
IAR20小鼠肝细胞
IEC-6大鼠小肠隐窝上皮细胞
LL-PK1,猪肾细胞
MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞
MDCK狗肾细胞
MEF小鼠胚胎成纤维细胞
NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞
P815小鼠肥大细胞
PA12小鼠成纤维细胞
RTE大鼠气管上皮细胞
SF9昆虫卵巢细胞
SMC兔主动脉平滑肌细胞
Vero猴肾细胞
WEHI-3小鼠血液细胞
Y2小鼠成纤维细胞
L6大鼠骨骼肌成肌细胞
NRK小鼠结缔组织细胞
AtT-20小鼠垂体瘤
BC3H1,鼠脑瘤
BV-2小鼠小胶质瘤细胞
C6大鼠脑胶质瘤
Cyc-tAg小鼠T淋巴细胞瘤(SV40T抗原转染)
EL-4鼠T淋巴细胞瘤
FOX-NY小鼠淋巴瘤细胞
GH3大鼠垂体瘤细胞
GT1.1小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素)
HEPA1-6小鼠肝癌细胞
MEL小鼠红白血病细胞
MFC小鼠前胃癌细胞
MMQ大鼠垂体瘤细胞
NG108-15小鼠神经细胞瘤/大鼠神经胶质细胞瘤杂交瘤细胞
P19小鼠畸胎瘤细胞
PC-12大鼠嗜铬细胞瘤细胞
RAW264.7小鼠巨噬细胞瘤
SP2/0-AG14小鼠骨髓瘤
Yac-1小鼠淋巴瘤细胞
H-4-II-E大鼠肝细胞瘤
L1210小鼠淋巴细胞白血病
RBL-1大鼠嗜碱性粒细胞白血病
MV-1-Lu鼬肺上皮细胞
NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞
293人胚肾细胞
L929小鼠成纤维细胞
293T人胚肾T细胞
HSC-T6大鼠肝星状细胞
GES-1人胃粘膜细胞
L-02人肝细胞
Lewis肺癌细胞
EAC艾氏腹水瘤细胞
LA795肺腺癌细胞
S180腹水瘤细胞
H22肝癌细胞
相关产品
小鼠氢/钾离子交换ATP酶β肽检测试剂盒,ATP4β试剂盒
小鼠丙酮酸羧化酶检测试剂盒,PC试剂盒
小鼠海藻糖酶检测试剂盒,TREH试剂盒
小鼠含铜胺氧化酶3检测试剂盒,AOC3试剂盒
小鼠补体成分4b检测试剂盒,C4b试剂盒
小鼠前蛋白转化酶枯草溶菌素9检测试剂盒,PCSK9试剂盒
小鼠双特异性磷酸酶1检测试剂盒,DUSP1试剂盒
小鼠巯基丙酮酸硫转移酶检测试剂盒,MPST试剂盒
小鼠D-多巴色素变位酶检测试剂盒,DDT试剂盒
小鼠Ⅶ型胶原检测试剂盒,COL7试剂盒
小鼠归巢关联细胞黏附分子检测试剂盒,HCAM试剂盒
小鼠白细胞弹性蛋白酶抑制因子检测试剂盒,LEI试剂盒
小鼠L1-细胞粘附分子检测试剂盒,L1CAM试剂盒
小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素检测试剂盒,TSLP试剂盒
小鼠毒蕈碱型胆碱受体M2检测试剂盒,CHRM2试剂盒
详细地址
联系电话
关注
拨打电话
留言咨询