供货周期: | 现货 |
品牌: | ATCC |
规格: | 株 |
货号: | yb3022 |
CAS号: |
大鼠肾细胞具体操作:
1.首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为第一步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。
2.然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)。
3.吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净瓶子里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)这是第三步。
4.然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。
大鼠肾细胞应用举例:
1.细胞表面分子的检测与分析;
2.细胞内或细胞核内抗原检测与分析——如胞内细胞因子、调节性T细胞(Treg,CD4+CD25+Foxp3+);
3.细胞凋亡的检测与分析——如PI单染法、Annexin-V-PI复染法、末端转移酶标记技术(TUNEL)、细胞周期特异性细胞凋亡的检测(PI-Annexin-V,PA法);
4.DNA含量检测与细胞周期的分析——如药物对细胞周期的影响、流式细胞核型分析;
5.细胞增殖的检测与分析。
大鼠肾细胞服务流程:
1.根据细胞特点、实验特点或实验需求,设计实验方案并与客户讨论确定实验方案;
2.进行预实验,通过转染含有GFP报告基因的质粒确定最佳转染试剂,并优化转染条件;
3.杀伤曲线绘制;
4.转染质粒,铺板,用不同抗生素浓度筛选细胞单克隆;
5.qPCR和WB检测稳定克隆的外源基因表达水平。
大鼠肾细胞注意事项:
1. 原代培养,一定要避免污染。
2. MEF生存能力有限,如果不冻存,体外存活十代左右。
3. 冻存后复苏的细胞只能传代一次,因为这些细胞繁殖能力有限。
4. 消化细胞时间不要过长。
一般实验流程
1筛选浓度测定:以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度
2细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
3细胞转染(病毒、脂质体、电穿孔、FuGENE 6)
4利用质粒上含有的抗性选择进行筛选
5鉴定筛选结果
大鼠肾细胞相关产品展示:
B16黑色素瘤细胞
MPC-83胰腺腺泡癌细胞
C3白血病细胞
RIN-m5Fβ胰岛素瘤
L1210淋巴白血病细胞
MA891乳腺癌细胞
TA2自发高乳腺癌细胞
SP2/0骨髓瘤细胞
U14宫颈癌细胞
YAC-1淋巴瘤细胞
G422神经胶质瘤细胞
TC-1HPV16,E6,E7和ras基因共转化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮细胞
SRA01/04人晶体上皮细胞系
MCF-7乳腺腺癌细胞
CNE-1高分化鼻咽癌细胞
MEF-7/Adr乳腺腺癌阿霉素耐药株
KB口腔表皮样癌细胞
SK-BR-3乳腺腺癌细胞
Hep-2喉癌细胞
A2780卵巢癌细胞
Ec109食管癌细胞
Coc2卵巢癌细胞
MGC-803胃腺癌细胞
OVCAR-3卵巢癌细胞
SGC7901胃低分代腺癌细胞
SK-OV-3卵巢癌细胞
HuTu-80十二指肠腺癌细胞
SKOV-3/DDP卵巢癌顺铂耐药株
Caco-2结肠癌细胞
HeLa宫颈癌细胞
CoLo205结肠癌细胞
HelaS3宫颈癌细胞
CoLo 320DM结肠癌细胞
HEC-1B子宫内膜癌细胞
HCT-8回盲肠腺癌细胞
JEG-3绒癌细胞
HCT-116低分化结肠腺癌细胞
DU-145前列腺癌细胞
HT-29结肠腺癌细胞
LNCa前列腺癌细胞
Lovo结肠癌细胞
LNCaP ybone FGC前列腺癌细胞
SW480结肠癌细胞
PC-3前列腺癌细胞
BEL-7402肝细胞癌细胞
Tsu-Pr1非雄激素依赖型前列腺癌
HCC-9204肝癌细胞
HOS骨肉瘤细胞
Hep3B肝癌细胞
MG-63成骨肉瘤细胞
Hep G2肝癌细胞
Saos-2骨肉瘤细胞
SMMC-7721肝癌细胞
U-2 OS骨肉瘤细胞
PAN-1胰腺导管上皮癌细胞
OS-732骨肉瘤细胞(瘤株)
Panc 10.05胰腺腺癌细胞
A-204横纹肌肉瘤细胞
SW1990胰腺腺癌细胞
HT1080纤维肉瘤细胞
SK-RC-42肾癌细胞
A375皮肤黑色素瘤细胞
RCC-krause肾癌细胞
A875黑色素瘤细胞
Ketr-3肾癌(瘤株)
SK-HEL-1皮肤黑色素瘤细胞
SW 13肾上腺皮质瘤细胞
A431皮肤基底细胞癌细胞
96-C低转移肺癌细胞
CEM白血病细胞
95-D高转移肺癌细胞
K562慢性髓原白血病细胞
973肺腺癌细胞
HPB-ALLT细胞白血病细胞
A2肺腺癌细胞
HL-60白血病细胞
相关产品
小鼠氢/钾离子交换ATP酶β肽检测试剂盒,ATP4β试剂盒
小鼠丙酮酸羧化酶检测试剂盒,PC试剂盒
小鼠海藻糖酶检测试剂盒,TREH试剂盒
小鼠含铜胺氧化酶3检测试剂盒,AOC3试剂盒
小鼠补体成分4b检测试剂盒,C4b试剂盒
小鼠前蛋白转化酶枯草溶菌素9检测试剂盒,PCSK9试剂盒
小鼠双特异性磷酸酶1检测试剂盒,DUSP1试剂盒
小鼠巯基丙酮酸硫转移酶检测试剂盒,MPST试剂盒
小鼠D-多巴色素变位酶检测试剂盒,DDT试剂盒
小鼠Ⅶ型胶原检测试剂盒,COL7试剂盒
小鼠归巢关联细胞黏附分子检测试剂盒,HCAM试剂盒
小鼠白细胞弹性蛋白酶抑制因子检测试剂盒,LEI试剂盒
小鼠L1-细胞粘附分子检测试剂盒,L1CAM试剂盒
小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素检测试剂盒,TSLP试剂盒
小鼠毒蕈碱型胆碱受体M2检测试剂盒,CHRM2试剂盒
详细地址
联系电话
关注
拨打电话
留言咨询