几十年来,组织学检测技术一直是病理诊断和生物医学研究的金标准,但传统基于2D组织切片获取图像信息的方式仅能帮助我们“管中窥豹,可见一斑”,不但无法获取全局完整组织信息反映样品内生物信息全貌,甚至可能与关键信息失之交臂。正所谓差之毫厘,谬以千里。更重要的是生物组织固有的三维属性使得生命科学的研究日益依赖于空间信息的完整解读:如脑部神经投射、血管分布以及肿瘤微环境研究等,均需围绕三维空间信息才能得以进行客观分析及后续研究。所以,拥有便捷可靠的3D信息获取途径是如今生命科学解码研究的关键所在。
近年来,光片显微技术以高效的三维成像特性,被应用于脑科学、肿瘤学、免疫学、药物研发、组织病理诊断等各个领域。但是生物组织的不均匀性,如各层组织中含有的水、脂质和蛋白质等各种分子造成光散射,以及细胞中的各类色素成分造成的光吸收,不仅限制了成像深度而且大大降低了图像对比度,想要对组织进行三维成像仍是个很大的挑战。因此组织透明化技术是开启当今光学切片显微镜全部潜能的关键!
自2013年CLARITY入选Science杂志的“十大突破”之一技术以来,不断涌现出各种透明化方法,几乎相当于将一个世纪前的组织透明化技术进行了重新发明,形成了以“水性透明化方法”、“油性透明化方法”以及“基于水凝胶透明化方法”的“三足鼎立“之势。相对而言,基于有机溶剂的方法,尽管透明化程度佳、效率高,但是荧光信号的兼容度有限;基于水溶性试剂的方法,虽然亲水性环境对荧光蛋白友好,但是透明化效率及程度有限;而基于水凝胶的方法,对蛋白质、核酸保护效果好,但是有些需要辅助设备(相应主动式方法速度快),所用配套的商业试剂相对昂贵、对操作有一定要求。
Pubmed实时搜索组织透明化引文结果
由于各种透明化方法均有其特点,因此研究人员需要根据自己的研究目的和实验方案选择最合适的透明化方法,以便得到较佳的实验结果。但是实际操作中,往往是在没有尝试并比较过几种透明化方法以前,是很难确定哪一种最合适,而且很多情况下仅仅因为试剂原料、溶液配制、浓度设置、pH调整等微小细节上,难以重复或无法重复文献中的惊艳效果,因而无法说是否可以“遇上“最合适的方法。
锘海新研发的透明化试剂盒是基于各种透明化方法测试和比较后,以及依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验,经过精心优化的配方,可以穿透细胞而不损伤自身及蛋白质结构,高效地进行脱色脱脂,采用亲水性温和环境的设计,使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能,轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化,适用范围广、操作简便、速度快、效率高,是广大科研工作者的较佳选择.
锘海透明化试剂盒
以小鼠脑为例透明化过程
透明化效果展示
成像结果展示(采集自锘海LS18平铺光片显微镜)
注:以上透明化和成像图片版权归锘海生命科学所有,图片盗用将追究责任。
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