NanoTemper Monolith X生物分子互作检测仪 蛋白质-多肽解决方案

Monolith X

分子互作仪

【轻松、快速、精准检测分子间相互作用】

产品简介：

Monolith 系列分子互作仪，采用创新性的光谱位移技术（Spectral Shift） 和 经 典 的 微 量 热 泳 动 技 术 ( MicroScale Thermophoresis, MST)，轻松检测最具挑战的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力，且检测浓度范围广、操作简单。

技术原理

• 光谱位移技术：通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光，因而能够精确检测到极细微的光谱位移。

• 微量热泳动技术：MST技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。
以配体浓度为横坐标，荧光值为纵坐标作图，从而获得平衡解离常数 K_d

产品优势：

•    双技术模块：可同时搭载光谱位移（Spectral Shift）和微量热泳动（MST）技术模块，可灵活升级

•    无需固定样品：可直接在溶液中定量检测

•    无惧分子量：各种分子互作轻松驾驭，蛋白质、核酸、多肽、小分子、离子、纳米颗粒等

•    节省样品：最低样品消耗量仅需 10μL，10分钟即可检测1个 K_d

•    智能优化：实时监测样本质量，并提供优化建议

•    无液流系统：无堵塞风险，免维护

产品优势 - 解决SPR难以应对的分子互作难题：

• 样品固定会阻碍 K_d 值的测定

SPR 中不合适的固定或再生条件会负面干扰配体结合。由于 Monolith 是在可控平衡条件下进行溶液内结合检测，因此可以帮助您测定固有无序蛋白（IDPs）等存在构象动态复杂变化的具有挑战性的样品。

• 待测分子与芯片基质间的非特异性结合

由于 SPR 无法区分待测分子是与固定在芯片上的样品还是芯片基质发生了结合，因此您还需要做进一步检测来识别和排除非特异性结合。而您在使用 Monolith 时无需专门检测此类非特异性结合，因为检测是在溶液内完成的。

• 强亲和力结合分析难度大

使用 SPR 评估强亲和力结合是极为困难的, 其原因是：强亲和力互作的解离速率极慢，而 SPR 需要通过解离速率来计算亲和力，因此您需要等待极长的时间才能准确测得此数据。而 Monolith 是直接检测结合，您完全无需等待。

• 检测共价结合

用 SPR 研究共价结合是非常繁琐的。而 Monolith 是直接在溶液内检测结合，您无需考虑如何再生芯片，这就使共价结合的检测变得非常容易。

应用方向：

蛋白质-小分子

蛋白质-蛋白质

蛋白质-离子

蛋白质-核酸

蛋白质-多肽

蛋白质-脂类

蛋白质-糖类

蛋白质-纳米颗粒

案例精选

[ 蛋白质-多肽: 小肽—受体激酶调控花粉与柱头识别的分子机理 ]

开花植物识别本物种花粉，而拒绝其他物种花粉的机制尚不清晰。2021 年，华东师范大学的研究人员发现， 拟南芥成熟未授粉的柱头内 ANJ-FER 受体激酶复合物与柱头内的 RALF33 多肽结合，引起活性氧产生。而 ANJ/FER 受体激酶复合物与花粉中花粉外壳蛋白 b 肽（PCP-Bs）互作，抑制 ROS 产生，使花粉水化。作 者通过推测 PCP-Bs 和 RALF33 多肽竞争结合 ANJ-FER 复合物，进而调节柱头中的 ROS 水平。 传统竞争结合方法实验步骤繁琐，且无法得到定量互作信息。作者利用 Monolith 完成了 RALF33, FER/ANJ 和 PCP-Bγ 三元复合体系中的竞争结合定量检测：将 RALF33 与 FER_ecd 孵育，使其达到结合平衡，然后加 入梯度稀释的 PCP-Bγ，检测得到 Ki 值为 2.5099 μM，即 PCP-Bγ 与 RALF33 竞争结合 FER_ecd/ANJ_ecd，从而 抑制 RALF33 诱导的柱头 ROS 的产生，加速了花粉水化。

红色曲线：FER_ecd 与 FITC-RALF33 的亲和力 K_d 为 0.1604μM

黄色曲线：加入 PCP-Bγ，其对 FERecd-RALF33 结合的抑制常数 K_i 为 0.5009μM

Liu, Chen, et al. "Pollen PCP-B peptides unlock a stigma peptide–receptor kinase gating mechanism for pollination." Science 372.6538 (2021)

耗材支持:

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关于NanoTemper:

德国NanoTemper始创于2008年，总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商，历经十余载发展，在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供更加优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术（MST）、微量差示扫描荧光技术（nanoDSF）和光谱位移技术（Spectral Shift）等创新技术，公司先后推出分子相互作用检测仪（Monolith系列）、蛋白稳定性分析仪（Prometheus 系列）、高通量亲和力筛选系统（Dianthus系列）以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 （ Andromeda X ）。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评，成为优选合作伙伴。

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