1.吸光度测量原理
当入射光频率与物质分子的震动频率一致,或者入射光引起物质分子电子能级跃迁,都会产生光学吸收现象。溶液的浓度越高,穿过溶液的分子也会相应地被吸收越多。当一定强度的光线通过物体的时候,被吸收部分越少,透过部分越多反之也然。
1852年比耳确定了吸光度与液浓度及液层厚度之间的关系,建立了光吸收的基本定律,称为朗伯-比耳定律。
朗伯比尔定律是吸光度测量的基本定律,是描述物质对某一波长光吸收的强弱与吸收物质的浓度及其液层厚度间的关系。当一束平行单色光通过液层厚度为b、吸光物质的浓度为c的单一均匀的,非散射的有色溶液时,溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度成正比。
A=kcb=lg(I0/I)
A: 为吸光度
k:为摩尔吸收系数(常用单位 L/(mol*mm))
c:为浓度(常用单位 mol/L)
b:为光程(常用单位 mm)
I0:入射光强度
I:透射光强度
图1 吸光度原理图
2.应用系统介绍
(1)发光源:能够输出稳定功率以及且连续光谱的辐射源,紫外波段实验室常使用脉冲氙灯或氘灯,可见波段实验室常使用卤钨灯。
(2)样品池:用于放置待检测样品,常用直接盛放样品的器件为石英比色皿,厚度一般为10mm,适用于紫外到可见光波段范围。
(3)检测设备:又称分光光度计,将光学分光器件和能实现光电转化的探测器集成。本此测量应用使用的系鉴知技术的SR50C光纤光谱仪,光谱仪内置脉冲氙灯同步触发功能,除了可搭配如下图一样的比色皿样品固定架进行测试,同时也可根据实际需求搭配侵入式光纤探头或流通池进行取样。
(4)显示器:连接光谱仪和笔记本电脑,显示测量过程中的数据,本此测量应用使用的系鉴知技术自主研发的上位机软件。
图2 脉冲氙灯吸光度检测系统图
3.实验示例
鉴知技术拥有自主研发的整套光谱吸光度测量系统和相关的配件,本次实验采用KNO3溶液,光谱仪采用北京鉴知技术有限公司的微型光纤光谱仪SR50C,在室温环境下进行测试,实验结果如下表所示:
光谱仪型号:SR50C(200-400 nm) | ||||
波长范围nm | 分辨率 nm | 可根据客户需要定制: 波长范围,分辨力大小,光谱仪尺寸大小 | ||
200-400 | 0.5 | |||
比色皿光程 | KNO3 浓度mg/L | 220nm 吸光度 | 275nm 吸光度 | 相关系数R2 |
10mm | 0.2 | 0.043278 | 0.044611 | 0.9978 |
0.3 | 0.067225 | 0.065858 | ||
0.4 | 0.087306 | 0.08754 | ||
0.5 | 0.115057 | 0.108142 | ||
0.8 | 0.166477 | 0.161765 | ||
1.0 | 0.207256 | 0.20099 |
表1 KNO3溶液在220nm,275nm处的吸光度
根据表中数据,绘制硝酸钾溶液吸光度随浓度变化的线性关系曲线,如下图所示。
图3 KNO3溶液浓度与吸光度线性关系
结论:由图得知硝酸钾溶液的吸光度与其浓度具有较大的线性相关关系,线性拟合系数R2=0.9978,标准曲线的方程式是:
A = 0.1985.74C + 0.0048
可根据拟合的标准曲线,将未知浓度样品的吸光度代入标准曲线的方程式中,得出未知样品的浓度。因此,鉴知紫外可见光谱仪能够在吸光度测量中有较好的测量结果满足客户的需求。
4.SR50C光纤光谱仪优势
体积小,重量轻,分辨率高;
灵敏度高,适用于微量元素分析;
测量准确性和一致性高;
价格优惠。
5.典型行业应用参考
行业或典型应用 | 光源 | 光谱仪 | 附件 |
高校或 实验室代替分光光度计 | 氘卤组合 | SR50C,SR75C, ST90S | 10mm 紫外石英比色皿 样品池 抗紫外光纤 |
在线水质仪器分析 | 脉冲氙灯/氘卤组合 | SR50C,SR75C | 10mm 紫外石英比色皿 样品池 抗紫外光纤 衰减器 |
烟气在线仪器分析 | 脉冲氙灯 | ST90S | 光纤、气室 |
超微量分光光度计 | 脉冲氙灯 | SR50C,SR75C,ST90S | - |
便携式多参数水质分析仪 | 脉冲氙灯 | SR50C,SR75C | - |
北京鉴知技术有限公司,简称“鉴知技术”, 是一家以光谱检测技术为核心的专业公司,产品已广泛应用于缉私缉毒、液体安检、食品安全、药品检测等诸多领域,公司致力于为客户提供更先进的产品和更快捷的物质识别方案。
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