如何制备单细胞测序细胞悬液？

上海莼试生物技术有限公司

2020/04/16 16:03

单细胞测序目前多采取仪器上门的服务模式，为保证细胞活力，取下新鲜组织后，样本即刻被制备成单细胞悬液，并在短时间内完成上机。因此，就出现了上面这些常见问题。样本的收集与运输难，甚至在一定程度上限制了单细胞技术的深入推广。那如何制备单细胞测序细胞悬液？对于细胞悬液制备没有经验，那就请按照以下的五步走啦：

第一步：从官网查看10x Genomics单细胞悬液制备官方建议

第二步：利用关键词查询与自己样本类型相同的已发表的单细胞测序文献

第三步：参考知名protocol分享网站，选择适合自己的protocol

四步：选用单细胞悬液制备或细胞分选的商业试剂盒

第五步：参考悬液制备和质控中的注意事项

研究人员使用流式细胞术比较了新鲜和保存液处理的小鼠肾脏细胞的存活率，并通过 scRNA-seq 分析，验证了保存液低温保存组织样本策略在长达 3 天的保存过程中，能够有效保持肾脏的细胞群体异质性、转录组完整性和免疫细胞转录组稳定性。该研究表明，在 4℃条件下，组织保存液能够完好保存原始样本，适用于进行较长距离运输。

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