方案摘要
方案下载应用领域 | 石油/化工 |
检测样本 | 其他 |
检测项目 | |
参考标准 | 细胞 |
人乳腺癌紫杉醇耐药株实验步骤: 1组织固定:烘箱温度65-75℃ 30min或者65℃隔夜; 2脱蜡:二甲苯浸泡三次,每次10分钟; 3水化:依次经过无水乙醇,95%乙醇,85%乙醇,70%乙醇浸泡,每次5min; 4洗涤:自来水冲洗1次,PBS浸泡3min; 5抗原修复:放入稀释100倍的柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0) 中,高压锅煮沸10min,常温冷却30min;
人乳腺癌紫杉醇耐药株实验步骤:
1组织固定:烘箱温度65-75℃ 30min或者65℃隔夜;
2脱蜡:二甲苯浸泡三次,每次10分钟;
3水化:依次经过无水乙醇,95%乙醇,85%乙醇,70%乙醇浸泡,每次5min;
4洗涤:自来水冲洗1次,PBS浸泡3min;
5抗原修复:放入稀释100倍的柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0) 中,高压锅煮沸10min,常温冷却30min;
6洗涤:纯水浸泡2次,PBS浸泡1次,每次3min;
7灭活酶:室温下3%过氧化氢-甲醇暗处处理切片15min;
8洗涤:纯水浸泡1次,PBS浸泡2次,每次3min;
9封闭:加入适当体积的super block(KT1002a Reagent A),37℃温箱孵育5min;
10洗涤:纯水浸泡1次,PBS浸泡2次,每次3min;
11一抗:加入反应体积为0.15ml,适合浓度的一抗, 37℃ 湿盒孵育60min。
12洗涤:PBST浸泡3次,PBS浸泡1次,每次3min;
13加入适当体积生物素标记的UltraTek Anti-Polyvalent的二抗(KT1002a Reagent B),37℃湿盒孵育10min;
14洗涤:PBST浸泡3次,PBS浸泡1次,每次3min;
15加入适当体积酶标亲和素UltraTek HRP(KT1002a Reagent C), 37℃湿盒孵育10min;
16洗涤:PBST浸泡3次,PBS浸泡1次,每次3min;
17显色:滴加适量DAB显色液(KT1003a)至切片上,室温显色1~5min,自来水冲洗;
18复染:苏木素染色5min,蒸馏水冲洗5min;
19分化: 0.5%盐酸乙醇混合液中分化,自来水冲洗3-4次, PBS中浸泡10-20秒返蓝,自来水冲洗2次。
20脱水:经过70%乙醇,85%乙醇,95%乙醇,无水乙醇浸泡,每次5min;
21透明:二甲苯浸泡2次,每次10-15min;
22封片:晾干后加中性树胶,盖玻片封片;
23结果:显微镜观察,记录结果。
田菁根瘤菌培养注意事项
黑化大家鼠肺成纤维细胞培养方法:
犬Ⅳ型胶原Col Ⅳ酶联检测试剂盒样本处理
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